Гост 21175 75: ГОСТ 21175-75 Меры индуктивности. Общие технические условия

Опубликовано в Разное
/
24 Авг 1990

Turkmenistan Laws|Official Regulatory Library — GOST 21175-75

Inductance actual measures. General specifications


Меры индуктивности. Общие технические условия

Status: Effective. The limitation of the effectiveness period has been lifted: Protocol No. 3-93 of the IGU dated 03.03.93 (IUS 5-6-1993)

The standard applies to inductance measures with nominal values, used as elements of measuring circuits of alternating current with frequency from 2 Hz to 30 MHz.


Стандарт распространяется на меры индуктивности с номинальными значениями, применяемые в качестве элементов измерительных схем переменного тока частотой от 2 Гц до 30 МГц.

Choose Language: EnglishSpanishGermanItalianFrenchChineseRussianTurkmen

Format: Electronic (pdf/doc)

Page Count: 8

Approved: Gosstandart of the USSR, 10/8/1975

SKU: RUSS65628






The Product is Contained in the Following Classifiers:

PromExpert » SECTION I. TECHNICAL REGULATION » V Testing and control » 3 Activities of testing laboratories » 3.2 Technical equipment of testing laboratories » 3.2.2 Measuring instruments and test equipment » 3.2.2.4 Instruments for electrical and magnetic measurements »

ISO classifier » 17 METROLOGY AND MEASUREMENTS. PHYSICAL PHENOMENA » 17.220 Electricity. Magnetism. Electrical and magnetic measurements » 17.220.20 Measurement of electrical and magnetic quantities »

National standards » 17 METROLOGY AND MEASUREMENTS. PHYSICAL PHENOMENA » 17.220 Electricity. Magnetism. Electrical and magnetic measurements » 17.220.20 Measurement of electrical and magnetic quantities »

National Standards for KGS (State Standards Classification) » Latest edition » P Measuring devices.

Automation and computing facilities » P3 Instruments for electrical and magnetic measurements » P33 Instruments for measuring electrical resistance, capacitance, inductance and mutual inductance »

The Document References:

RD 50-690-89: Methodological instructions. Industrial product dependability. Methods for estimating dependability based on experimental data.

The Document is Referenced By:

GOST 16809-78: Start-control devices for gas-discharge lamps. General specifications

GOST 16809-88: Starter and control devices

GOST 8.320-78: State system for ensuring the uniformity of measurements. Flow meter electromagnetic industry. Methods and means for verification

GOST R 8.686-2009: State system for ensuring the uniformity of measurements. A.C. balanced bridges. Verification methods

MI 1985-89: Recommendation. State system for ensuring uniformity of measurements. Measures of inductance and mutual inductance. Method of verification

Customers Who Viewed This Item Also Viewed:


Steel structures

Language: English

Loads and actions

Language: English

Soil bases of buildings and structures

Language: English

Technical regulations of the Eurasian Economic Union «On requirements for fire safety and fire extinguishing means»

Language: English

Preparation of general cargoes for transportation. General requirements

Language: English

Electomagnetic compatibility of technical equipment. Railway systems and equipment. Part 3-1. Railway rolling stock. Requirements and test methods

Language: English

Wheeled pairs of railway rolling stock. Methods for determination of strength indicators

Language: English

Concrete with polysterene aggregates. Specifications

Language: English

Dangerous goods. Marking

Language: English

Vessels and apparatus.

Norms and methods of strength calculation. Calculation of cylindrical and conical shells, convex and flat bottoms and covers

Language: English

Seismic building design code

Language: English

Rostechnadzor Order No. 656 dated 30.12.2013 of the Federal Service for Environmental, Technological and Nuclear Supervision about approval of Federal norms and regulations in the field of industrial safety «Safety rules for obtaining, transporting, and using melts of ferrous and non-ferrous metals as well as alloys based on these melts»

Language: English

Safety guide on nuclear energy use

Language: English

Concrete and reinforced concrete structures. Key Points

Language: English

Unified system of design documentation. Operational documents

Language: English

Unified system of design documentation. Rules for the implementation of operational documents

Language: English

Aviation fuel for gas turbine engines JET A-1 (Jet A-1). Specifications

Language: English

About the presence of a typo in GOST 28566-90

Language: English

Non-destructive testing. Fusion welding of metals. Welds classification by radiography testing results

Language: English

Packing for products of engineering industry. General requirements.

Language: English

YOUR ORDERING MADE EASY!

TurkmenistanLaws.com is an industry-leading company with stringent quality control standards and our dedication to precision, reliability and accuracy are some of the reasons why some of the world’s largest companies trust us to provide their national regulatory framework and for translations of critical, challenging, and sensitive information.

Our niche specialty is the localization of national regulatory databases involving: technical norms, standards, and regulations; government laws, codes, and resolutions; as well as RF agency codes, requirements, and Instructions.

We maintain a database of over 220,000 normative documents in English and other languages for the following 12 countries: Armenia, Azerbaijan, Belarus, Kazakhstan, Kyrgyzstan, Moldova, Mongolia, Russia, Tajikistan, Turkmenistan, Ukraine, and Uzbekistan.

Placing Your Order

Please select your chosen document, proceed to the ‘checkout page’ and select the form of payment of your choice. We accept all major credit cards and bank wire transfers. We also accept PayPal and Google Checkout for your convenience. Please contact us for any additional arrangements (Contract agreements, PO, etc.).

Once an order is placed it will be verified and processed within a few hours up to a rare maximum of 24 hours.

For items in stock, the document/web link is e-mailed to you so that you can download and save it for your records.

For items out of stock (third party supply) you will be notified as to which items will require additional time to fulfil. We normally supply such items in less than three days.

Once an order is placed you will receive a receipt/invoice that can be filed for reporting and accounting purposes. This receipt can be easily saved and printed for your records.

Your Order Best Quality and Authenticity Guarantee

Your order is provided in electronic format (usually an Adobe Acrobat or MS Word).

We always guarantee the best quality for all of our products. If for any reason whatsoever you are not satisfied, we can conduct a completely FREE revision and edit of products you have purchased. Additionally we provide FREE regulatory updates if, for instance, the document has a newer version at the date of purchase.

We guarantee authenticity. Each document in English is verified against the original and official version. We only use official regulatory sources to make sure you have the most recent version of the document, all from reliable official sources.

vak | Свежие записи

.

Публикую историю моей знакомой из Донецка. Она пожелала остаться анонимной.

Я хочу написать о том, как все было на самом деле. Ну потому, что не могу больше слышать про то, что 8 лет люди Донецка и Луганска подвергаются геноциду и издевательствам со стороны Киевского режима. А так же, не могу больше слышать вопрос почему 8 лет Украина не защищала своих граждан на территории этих городов.

Я родилась, выросла и прожила до 35 лет в городе Донецке. Мои родственники до сих пор живут в Донецке. Я не хочу подвергать их опасности со стороны властей ДНР, и поэтому не раскрываю своего имени.

В мае 2014 года я была в Донецке и видела, как все начиналось своими глазами. Сначала было смешно и нелепо, потому что, например, по бульвару Пушкина ходили два странных парня и представлялись ополченцами. У одного в руках был огромный, молот, у второго лук и стрелы. Я тогда смеялась, говорила маме: «Посмотри, Вильгельм Тель и Тор, два придурка, ну кого они напугают?». Потом стало страшнее. Возле здания облсовета жгли покрышки и колотили в алюминиевые кастрюли, стояли ужасная вонь и грохот. 9 мая на площади Ленина (да у нас ее так и не переименовали, и памятник не снесли) играл оркестр Донецкой филармонии. Играли разную музыку, потом заиграли гимн Украины. В этот момент на сцену вылез испитой человек, по виду бомж, с автоматом в руках. Он потребовал, чтоб дирижёр прекратил играть «хохлятский гимн». Дирижёр интеллигентно пытался объяснить, что это же праздник, День Победы, что в этот день всегда играют гимн. Бомж шёл на него, поливал его матом и угрожал оружием. И вот это было уже реально страшно.

Потом был референдум. И я тоже своими глазами видела вереницы людей, которые шли голосовать «ЗА независимую республику». Их устраивало, что к власти придут малограмотные агрессивные люди. И не пугал комендантский час и военный режим. Они хотели быть частью России, а точнее они хотели российских пенсий. И надо сказать, они получили их, и многие до самого закрытия границ ДНР Руководством ДНР, получали 2 пенсии Украинскую и Российскую. Я хочу ещё раз подчеркнуть, ГРАНИЦА ДНР и Украины БЫЛА ПЕРЕКРЫТА ТОЛЬКО В 2021 ГОДУ, ТОЛЬКО СО СТОРОНЫ ДНР, жителям объяснили, что это связано с Covid 19, для их же блага🤷🏼. Украина сделала несколько попыток договориться об открытии границ (обговаривали места пропуска, количество пропускаемых людей в день, и т.п.), но власти ДНР каждый раз меняли требования, и в конце концов отказались открыть пункты пропуска. Еще раз – Украина не отказывалась впускать и выпускать «жителей ОРДЛО» (отдельный районов Донецкой и Луганской областей, так называется ДНР и ЛНР в Украине).

Но вернёмся к тому, что я видела. Несколькими днями позже референдума, мы гуляли с ребёнком в сквере Калининского района и встретили маму одноклассницы моего ребёнка. Она была в приподнятом настроении, весело рассказывала о том, что проголосовала, о том, что «Донецк теперь наш!» (чей «Наш» не было понятно) и что «вот еще неделька, и мы пойдем на Мариуполь». Все это выглядело очень странно, потому что женщина была инвалидом (хромала). Я пишу об этом случае потому, что хочу объяснить: довольно большая часть жителей Донецка действительно хотела отделения от Украины не только для нашего города, но и очевидно для всей Донецкой области.

Ещё пару слов о референдуме. Пункты голосования были организованны на каждом шагу, в каждой школе и других учреждениях. А вот бланки голосований выглядели очень скромно, никакой серьезной защиты информации от подделывания информации на них не было. Вы можете найти их в Википедии и составить своё мнение о них сами. Нужно ли говорить, что мнения людей которые были против отделения от Украины никто не учёл. Я голосовать не ходила, в тот момент происходящее мне все ещё казалось не серьёзным. Фарсом казалось.
Больших ужасов мне увидеть не пришлось, я лишь пару раз слышала стрельбу из автомата.

23 мая 2014 года я вылетела из аэропорта Донецка в другую страну по личным делам. Моя мама и ребенок остались в Донецке, как ни в чем не бывало. Мы не верили, не понимали что происходит.
25 мая 2014 года аэропорт Донецка прекратил свою работу в связи с началом военных действий.
Через неделю моя мама и ребенок выезжали из Донецка поездом, обстановка была такая, что мама не была уверенна, поедет ли поезд в Киев или нет. Она взяла с собой только моего ребенка и легкую сумку с документами – она не была уверена, что кто-нибудь довезет ее до ЖД вокзала (многие таксисты отказывались ехать в ту сторону, в связи с боевыми действиями в том районе). Она предполагала, что ей придется идти пешком из Калининского района до ЖД вокзала (около 14 километров). К счастью, таксист отвез их на вокзал, и поезд отправлялся. Проводница сказала занять свои места, лечь на живот, накрыть голову подушками, выключить свет, и закрыть окна в купе шторами: «Будем пробовать прорваться».
Это то, что видела я, и что пережила моя семья. К счастью – не много.

Я хочу рассказать еще об одном эпизоде. В Донецке остались мои друзья, я систематически поддерживаю с ними связь и хочу привести пример беседы с моим другом. Разговор состоялся летом 2021 года.
Цитирую дословно: «Как же заебал этот ДНР. Они не выпускают нас вообще никуда. Совсем Ахуели. Мы даже не можем выехать к (Азовскому) морю, нам нужно взять какую-нибудь курсовку или кучу справок, чтобы поехать туда хотя бы на выходные. В прошлом году мы могли поехать хотя бы туда (в пгт Седово, находится на побережье Азовского моря, территория ДНР). В этом году они нас совсем не выпускают».
Другой мой разговор с этим же человеком состоялся 25 февраля 2022 года (когда война уже началась): «Ну, а мне и не жаль, что такое происходит на Украине. Восемь лет нас душили и не выпускали, теперь пусть почувствуют, как это.»
От себя хочу заметить, что до 25 февраля 2022 года, я ни разу не слышала от этого человека слов о том, что Украина их «душила» и куда-либо не пускала.

Для тех, кто бесконечно задает вопрос о том, почему Украина не защищала своих граждан в ДНР, хочу добавить, что практически все нынешние жители ДНР с большим восторгом получили паспорта России. 
И теперь, в связи с этим, встает вопрос: Гражданами какой страны являются эти люди? И какая страна должна заботиться о них?

Это все, что я хотела сказать, каждое слово правда. Выводы делайте сами.

Armenia Laws|Official Regulatory Library — GOST R 8.686-2009

State system for ensuring the uniformity of measurements. A.C. balanced bridges. Verification methods


Государственная система обеспечения единства измерений. Мосты переменного тока уравновешенные. Методика поверки

Status: Effective — Introduced for the first time

This standard applies to balanced measuring bridges of alternating current according to GOST 9486 and automatic digital bridges of alternating current according to GOST 25242, intended for measuring electrical capacitance C from 1 * 10 (to the power of minus fifteen) to 1 * 10 (to the power of minus one) F, inductance L from 1 * 10 (to the power of minus nine) to 2 * 10 (to the power of three) H, active electric resistance R from 1 * 10 (to the power of minus two) to 1 * 10 (to the power of eight) Ohm, active electric conductivity G from 1 * 10 (to the power of minus eight) to 1 * 10 (to the power of two) See, tanga NSA loss angle tg delta from 1 * 10 (to the power minus five) to 2, Q of Q from 1 * 10 (to the power minus two) to 250, tangent of the angle of the phase shift to tg «fi» from 1 * 10 (to the power minus four) to 10, the time constant «mau» from 1 * 10 (to the power of minus nine) to 1 * 10 (to the power of minus four) with sinusoidal voltage at the object of measurement U to 200 V in the frequency range f from 40 to 1 * 10 (to the power of six) Hz. The standard establishes the methodology for the initial and periodic verification of bridges of accuracy classes from 0.001 to 5 and periodic verification of bridges of the 2nd and 3rd categories. According to the method of this standard, it is allowed to check bridges in the frequency range of 10 — 40 and 1 * 10 (to the power of six) — 1 * 10 (to the power of seven) Hz, measuring installations (including calibration) based on balanced AC bridges, as well as measuring capacitance, inductance, active resistance, active conductivity, loss tangent, quality factor, collected according to schemes, other than bridge ones, with metrological characteristics that meet the requirements of this standard. This standard does not apply to bridges for special measurements (for example, electrochemical and magnetic measurements, measurements of non-electrical quantities and insulation resistance) and bridges-comparators


Настоящий стандарт распространяется на уравновешенные измерительные мосты переменного тока по ГОСТ 9486 и автоматические цифровые мосты переменного тока по ГОСТ 25242, предназначенные для измерения электрической емкости C от 1*10 (в степени минус пятнадцать) до 1*10 (в степени минус один) Ф, индуктивности L от 1*10 (в степени минус девять) до 2*10 (в степени три) Гн, активного электрического сопротивления R от 1*10 (в степени минус два) до 1*10 (в степени восемь) Ом, активной электрической проводимости G от 1*10 (в степени минус восемь) до 1*10 (в степени два) См, тангенса угла потерь tg дельта» от 1*10 (в степени минус пять) до 2, добротности Q от 1*10 (в степени минус два) до 250, тангенса угла фазового сдвига tg «фи» от 1*10 (в степени минус четыре) до 10, постоянной времени «мау» от 1*10 (в степени минус девять) до 1*10 (в степени минус четыре) с при синусоидальном напряжении на объекте измерения U до 200 В в диапазоне частот f от 40 до 1*10 (в степени шесть) Гц. Стандарт устанавливает методику первичной и периодической поверок мостов классов точности от 0,001 до 5 и периодической поверки мостов 2-го и 3-го разрядов. По методике настоящего стандарта допускается поверять мосты в диапазоне частот 10 — 40 и 1*10 (в степени шесть) — 1*10 (в степени семь) Гц, измерительные установки (в том числе поверочные) на основе уравновешенных мостов переменного тока, а также измерительные емкости, индуктивности, активного сопротивления, активной проводимости, тангенса угла потерь, добротности, собранные по схемам, отличным от мостовых, с метрологическими характеристиками, удовлетворяющими требованиям настоящего стандарта. Настоящий стандарт не распространяется на мосты для специальных измерений (например, электрохимических и магнитных измерений, измерений неэлектрических величин и сопротивления изоляции) и на мосты-компараторы

Choose Language: EnglishSpanishGermanItalianFrenchChineseRussianArmenian

Format: Electronic (pdf/doc)

Page Count: 32

Approved: Federal Agency for Technical Regulation and Metrology, 12/15/2009

SKU: RUSS70828






The Product is Contained in the Following Classifiers:

PromExpert » SECTION II. METROLOGICAL » I Organizational and technical bases of metrological support » 2 Technical basics of metrological support » 2.3 Verification, calibration and testing of measuring instruments » 2.3.8 Measurements of electrical and magnetic quantities, radio engineering and radio electronic measurements »

ISO classifier » 17 METROLOGY AND MEASUREMENTS. PHYSICAL PHENOMENA » 17.220 Electricity. Magnetism. Electrical and magnetic measurements » 17.220.20 Measurement of electrical and magnetic quantities »

National standards » 17 METROLOGY AND MEASUREMENTS. PHYSICAL PHENOMENA » 17.220 Electricity. Magnetism. Electrical and magnetic measurements » 17.220.20 Measurement of electrical and magnetic quantities »

National Standards for KGS (State Standards Classification) » Latest edition » T General technical and organizational and methodological standards » T8 State measurement system » T88 Methods of verification and metrological certification »

National Standards for KGS (State Standards Classification) » Latest edition » T General technical and organizational and methodological standards » T8 State measurement system » T88 Methods of verification and metrological certification » T88. 1 Measurement of geometric quantities »

National Standards for KGS (State Standards Classification) » Latest edition » T General technical and organizational and methodological standards » T8 State measurement system » T88 Methods of verification and metrological certification » T88.8 Measurements of electrical and magnetic quantities, radio engineering and radio electronic measurements »

The Document References:

Federal Law 184-FZ: About technical regulation

GOST 12.1.030-81: Electrical safety protective grounding, neutral grounding

GOST 12.2.007.0-75: Occupation safety standards system Electrical equipment. General safety requirements

GOST 12.2.007.3-75: Occupational safety standard system. Electrotechnical devices for voltage more than 1 000 v

GOST 12.3.019-80: Occupational safety standards system. Electrical tests and measurements. General safety requirements

GOST 16863-71: Measuring generators for frequency range 0,1-35 MHz Methods and means of verification

GOST 21175-75: Inductance actual measures. General specifications

GOST 22261-94: Measuring instruments for electrical

GOST 23737-79: Standard electrical resistances

GOST 25242-93: Digital immitance parameter meters

GOST 6746-94: Measures of electrical capacitance. General technical requirements

GOST 8.028-86: State system for ensuring the uniformity of measurements. State primary standard and state verification schedule for means measuring electrical resistance

GOST 8.237-2003: State system for ensuring the uniformity of measurements. Single-value electrical resistance measures. Verification procedure

GOST 8.255-2003: State system for ensuring the uniformity of measurements. Electrical capacity measures. Verification procedure

GOST 8.294-85: State system of ensuring the uniformity of measurements. A.c. balanced bridges. Calibration methods

GOST 8.314-78: State system for ensuring the uniformity of measurements. Low-frequency generators. Methods and means of verification

GOST 8.371-80: State system for ensuring the uniformity of measurements. State primary standard and all-union verification schedule for means measuring electrical capacity

GOST 8711-93: Direct acting indicating analogue electrical measuring instruments and their accessories. Part 2. Special requirements for ammeters and voltmeters

GOST 9486-79: Measuring ac bridges

GOST R 1.0-2004: Standardization in the Russian Federation. Basic provisions

PR 50.2.012-94: GSOEI. The procedure for certification of measuring instruments

RMG 29-99: State system for ensuring the uniformity of measurements. Metrology. Basic terms and definitions

Customers Who Viewed This Item Also Viewed:


Steel structures

Language: English

Loads and actions

Language: English

Soil bases of buildings and structures

Language: English

Technical regulations of the Eurasian Economic Union «On requirements for fire safety and fire extinguishing means»

Language: English

Preparation of general cargoes for transportation. General requirements

Language: English

Electomagnetic compatibility of technical equipment. Railway systems and equipment. Part 3-1. Railway rolling stock. Requirements and test methods

Language: English

Wheeled pairs of railway rolling stock. Methods for determination of strength indicators

Language: English

Concrete with polysterene aggregates. Specifications

Language: English

Dangerous goods. Marking

Language: English

Vessels and apparatus. Norms and methods of strength calculation. Calculation of cylindrical and conical shells, convex and flat bottoms and covers

Language: English

Seismic building design code

Language: English

Rostechnadzor Order No. 656 dated 30.12.2013 of the Federal Service for Environmental, Technological and Nuclear Supervision about approval of Federal norms and regulations in the field of industrial safety «Safety rules for obtaining, transporting, and using melts of ferrous and non-ferrous metals as well as alloys based on these melts»

Language: English

Safety guide on nuclear energy use

Language: English

Concrete and reinforced concrete structures. Key Points

Language: English

Unified system of design documentation. Operational documents

Language: English

Unified system of design documentation. Rules for the implementation of operational documents

Language: English

Aviation fuel for gas turbine engines JET A-1 (Jet A-1). Specifications

Language: English

About the presence of a typo in GOST 28566-90

Language: English

Non-destructive testing. Fusion welding of metals. Welds classification by radiography testing results

Language: English

Packing for products of engineering industry. General requirements.

Language: English

YOUR ORDERING MADE EASY!

ArmeniaLaws.com is an industry-leading company with stringent quality control standards and our dedication to precision, reliability and accuracy are some of the reasons why some of the world’s largest companies trust us to provide their national regulatory framework and for translations of critical, challenging, and sensitive information.

Our niche specialty is the localization of national regulatory databases involving: technical norms, standards, and regulations; government laws, codes, and resolutions; as well as RF agency codes, requirements, and Instructions.

We maintain a database of over 220,000 normative documents in English and other languages for the following 12 countries: Armenia, Azerbaijan, Belarus, Kazakhstan, Kyrgyzstan, Moldova, Mongolia, Russia, Tajikistan, Turkmenistan, Ukraine, and Uzbekistan.

Placing Your Order

Please select your chosen document, proceed to the ‘checkout page’ and select the form of payment of your choice. We accept all major credit cards and bank wire transfers. We also accept PayPal and Google Checkout for your convenience. Please contact us for any additional arrangements (Contract agreements, PO, etc.).

Once an order is placed it will be verified and processed within a few hours up to a rare maximum of 24 hours.

For items in stock, the document/web link is e-mailed to you so that you can download and save it for your records.

For items out of stock (third party supply) you will be notified as to which items will require additional time to fulfil. We normally supply such items in less than three days.

Once an order is placed you will receive a receipt/invoice that can be filed for reporting and accounting purposes. This receipt can be easily saved and printed for your records.

Your Order Best Quality and Authenticity Guarantee

Your order is provided in electronic format (usually an Adobe Acrobat or MS Word).

We always guarantee the best quality for all of our products. If for any reason whatsoever you are not satisfied, we can conduct a completely FREE revision and edit of products you have purchased. Additionally we provide FREE regulatory updates if, for instance, the document has a newer version at the date of purchase.

We guarantee authenticity. Each document in English is verified against the original and official version. We only use official regulatory sources to make sure you have the most recent version of the document, all from reliable official sources.

Abstract

3.1 ISRE Signatures

Из баз данных GEO и ENCODE [5, 21] мы загрузили наборы данных STAT1, STAT2 и IRF9 ChIPseq, собранные при стимуляции IFN для мышиных макрофагов, полученных из костного мозга (BMDM), фибробластов и B-клеток, и в человеческих клетках HeLa, K562 и THP1. Для клеток B и K562 были доступны только наборы данных STAT1 и STAT2 ChIPseq. Все наборы данных были собраны между 1,5-6 часами после стимуляции IFN, относительно рано в ответе IFN, но в течение периода времени, когда было показано, что большинство ISG активируются [52].Наборы данных действительно различались по IFN типа I, IFNa или IFNb, а также по концентрации IFN, подробности см. в таблице 2.

Для каждого набора данных ChIPseq мы назвали пики с помощью MACS2, [87], ограничив наше внимание пиками в пределах 100 т.п.н. от сайтов начала транскрипции генов (TSS) в геномах мыши (mm10) и человека (hg38). BMDM имел гораздо больше пиков, чем другие типы клеток, примерно 40 000 по сравнению с 1500-6000, а типы клеток мыши имели больше пиков, чем типы клеток человека, даже если исключить BMDM, конкретные значения см. в Таблице 4.Большое количество пиков BMDM может отражать уникальную роль BMDM во врожденном ответе. Разница в количестве пиков между типами клеток мыши и человека может быть связана с низкой чувствительностью связывания антител ChIP в клетках человека, особенно IRF9, как обсуждается в [61].

biorxiv;2020.09.08.287581v1/TBL4T4tbl4Таблица 4: Ассоциация пиков STAT1, STAT2 и IRF9 ChIPseq с ISRE.

Для каждого типа клеток показаны (STAT1, STAT2, IRF9) количество пиков, вызванных для наборов данных STAT1, STAT2 и IRF9, соответственно, и (STAT1 (%), STAT2 (%), IRF9 (%)) доля пиков, которые мы связали с ISRE.Мы связывали пик с ISRE, если вершина пика находилась в пределах 10 пар оснований от ISRE.

ChIPseq Peaks и ISRE

Чтобы связать пики ChIP с ISRE, мы определили ISRE как любую последовательность из 10 пар оснований, которая соответствует каноническому мотиву ISRE TTTCNNTTTC или отличается от него одним нуклеотидом (где NN допускает любой нуклеотид) и затем локализовали все такие последовательности в пределах 100 т. п.н. от гена TSS либо на положительной, либо на отрицательной цепях. Мы связывали ISRE с пиком ChIP, если ISRE находился в пределах 10 пар оснований от вершины пика.

Согласно нашему определению ISRE, существует 2,5 и 3,1 миллиона ISRE в пределах 100 КБ от TSS в геноме мыши и человека, соответственно, но только несколько тысяч были связаны с пиками. И наоборот, в то время как небольшое количество ISRE связано с пиками, большой процент пиков связан с ISRE, как показано в таблице 4. За исключением клеток THP1, более 30% и 56% пиков STAT2 и IRF9, соответственно, связаны с ISRE. От 34% до 50% пиков STAT1 связаны с ISRE для BMDM, HeLa и K562, но менее 20% для фибробластов и В-клеток.Поскольку последовательности, которые отличаются более чем на один нуклеотид от TTTCNNTTTC, могут функционально служить ISRE, более высокая доля пиков может быть связана с ISRE, чем наши оценки.

Для данного типа клеток мы называем ISRE, связанный с пиком, связанным ISRE, и мы классифицируем связанный ISRE по комбинации связанных пиков STAT1, STAT2 и IRF9: класс STAT2 ISRE — это те ISRE, которые связаны только с STAT2 пики, класс STAT2. IRF9 ISRE — это те ISRE, которые связаны как с пиком STAT2, так и с пиком IRF9, но не с пиком STAT1, и так далее.В 3 из 4 типов клеток, для которых у нас были данные CHIP STAT1, STAT2 и IRF9, а именно BMDM, фибробласты и клетки HeLa, за исключением THP1, 99% связанных ISRE находились в STAT2 (связанных только STAT2). Классы STAT2.IRF9 (связанные STAT2 и IRF9), STAT1.STAT2.IRF9 или IRF9 ISRE, а также ассоциации с участием STAT1 в отсутствие STAT2 были редки. Кроме того, во всех трех типах клеток более 60% связанных ISRE относились к классам STAT2.IRF9 или STAT1.STAT2.IRF9 ISRE. Напротив, в THP1 ISRE в классах STAT1 (только STAT1) или STAT2 (только STAT2) составляет 11% и 77%, соответственно, связанного ISRE, что, возможно, отражает проблемы чувствительности при связывании антител ChIP.В K562 и B-клетках селезенки, двух типах клеток, для которых у нас не было данных IRF9 ChIP, 99% связанного ISRE относились к классам STAT2 или STAT1.STAT2 ISRE, что соответствует большому проценту связанного ISRE в STAT2, Классы STAT2. IRF9 и STAT1.STAT2.IRF9 в клетках BMDM, фибробластах и ​​HeLa. См. Таблицу 5.

biorxiv;2020.09.08.287581v1/TBL5T5tbl5Таблица 5: Количество связанных ISRE и их распределение по классам ISRE.

Мы связали пики STAT1, STAT2 и IRF9 с ISRE, как описано в тексте.Мы назвали ISRE, связанный по крайней мере с одним типом пика, связанным ISRE. Для каждого типа ячеек показано (n) количество связанных ISRE и процент связанных ISRE в каждом классе ISRE. Для клеток B и K562 у нас не было наборов данных IRF9 ChiPseq, что ограничивало нас классами STAT1, STAT2 и STAT1.STAT2 ISRE. (S1.S2=STAT1.STAT2, S2.I9=STAT2.IRF9 и т. д.).

В целом, наш анализ пиков и ISRE согласуется с существующими результатами [6, 61]: большая часть связывания компонентов ISGF3 была связана с ISRE, связывание STAT1 с ISRE независимо от STAT2 было редким, и большая часть связывания ISRE включала STAT2:IRF9 димеры или ISGF3.

Связывание ISRE между генами

Мы связали каждый связанный ISRE с геном с ближайшим TSS. Поскольку регуляторные элементы промотора и энхансера различаются по состоянию хроматина и функциональным свойствам [22], мы разделили область в пределах 100 пар оснований TSS гена на энхансерную область, которая включала положения 3–100 т.п.н. от TSS, и промоторную область, которая включала позиции внутри 500 пар оснований TSS. Мы не утверждаем, что ISRE в энхансерной и промоторной областях функционально действуют как энхансеры или промоторы соответственно; вместо этого мы используем терминологию предположительно и подчеркиваем различные характеристики ISRE в двух регионах, как мы опишем ниже.Мы намеренно оставили промежуток в позициях 500-3000 от TSS между промоторной и энхансерной областями для большего разделения состояния и функциональности хроматина.

Нас интересовало количество связанных ISRE и их позиционное распределение внутри генов. Хотя мы могли идентифицировать связанный ISRE с высокой специфичностью (учитывая, что связанный ISRE отражает пересечение пика ISRE и ChIPseq), мы, вероятно, пропустили связанный ISRE, который не находился в пределах одного нуклеотида мотива TTTCNNTTTC, как отмечалось выше. Имея это в виду, мы использовали отсутствие пиков STAT1, STAT2 и IRF9 в регионе, а не отсутствие связанного ISRE, как свидетельство того, что в регионе не существует связанного ISRE.

Из генов, по крайней мере, с одним связанным ISRE, которые мы называем связанными генами, 82% в типах клеток мыши и 95% в типах клеток человека имели от 1 до 6 связанных ISRE. Небольшое количество связанных генов имело большое количество связанных ISRE, отражающих повторяющиеся соседние ISRE. Например, при BMDM ген RHOH имел 16 ISRE, содержащихся в области из 185 пар оснований (chr5:65834014-65834198 в mm10), из которых 13 находились в STAT1.STAT2.IRF9 связывает класс ISRE. На рис. 1 показано количество связанных ИСРЕ в БДММ на разных расстояниях относительно ТСС. Другие типы клеток показали аналогичную картину. Связанные ISRE были в более высокой концентрации вблизи TSS, в промоторной области, и падали в концентрациях по мере удаления от TSS. Однако большая часть связанного ISRE, 82% и 70% в типах клеток мыши и человека соответственно, попала в область энхансера.

biorxiv;2020.09.08.287581v1/FIG1F1fig1Рис. 1: Распределение ISRE по отношению к TSS.

Показаны количества связанных ISRE в BMDM в соответствии с расстоянием ISRE от сайта начала транскрипции гена (TSS). Связанные ISRE были наиболее плотными вблизи TSS, в промоторных областях, но 70–80% связанных ISRE были дистальнее TSS, в энхансерных областях.

Чтобы понять позиционное распределение связанного ISRE в генах, мы рассмотрели три конфигурации связанных генов: связанный ISRE в области промотора, в области энхансера, а также в области промотора и энхансера.Во всех типах клеток от 12 до 25% связанных генов имели связанный ISRE в промоторе, в то время как более 60% связанных генов имели связанный ISRE в области энхансера. Связанные гены со связанным ISRE как в энхансере, так и в промоторе встречались редко, менее 5% среди всех генов

Поскольку мы могли пропустить значительное количество связанных ISRE, проценты этих трех конфигураций могут быть необъективными. Чтобы устранить это потенциальное смещение, мы рассмотрели две дополнительные позиционные конфигурации: связанный ISRE только в промоторе и связанный ISRE только в энхансере.Для этих двух конфигураций мы использовали отсутствие пика STAT1, STAT2 или IRF9, чтобы сделать вывод об отсутствии связанного ISRE, как обсуждалось выше. В разных типах клеток более 43% связанных генов имели связанный ISRE только в энхансере. И во всех типах клеток, кроме BMDM, более 11% связанных генов имели ISRE только в промоторе, при этом BMDM имел 3%. См. верхнюю часть рисунка 2.

biorxiv;2020.09.08.287581v1/FIG2F2fig2Рисунок 2: Распределение связанных ISRE по промоторным и энхансерным областям.

Мы определили связанный ген как ген со связанным ISRE в пределах 100 т.п.н. от TSS. (Верхняя панель) Для каждого типа клеток столбцы показывают (слева направо) долю связанных генов со связанным ISRE в области промотора, со связанным ISRE только в области промотора, со связанным ISRE в области энхансера и с связанный ISRE только в области энхансера. (Нижняя панель) То же, что и верхняя панель, за исключением того, что мы рассматриваем связанные ISG, а не связанные гены.

Эти результаты подтверждают модель, в которой значительный процент связывания ISRE ограничивается энхансерными областями гена.Однако наша способность исключить наличие связанного ISRE по отсутствию пиков зависит от агрессивности нашего пикового вызова, который мы установили, используя FDR 0,01 в MACS2. Более агрессивный вызов пиков приведет к большему количеству пиков и, следовательно, уменьшит процент связанных генов, которые мы помещаем в категорию только энхансеров. Но вызов пиков зависит от уровней сигнала ChIP, и если мы пропускаем пики, это обязательно пики с более низким сигналом. В этом случае наши результаты переключились бы с дихотомии, т.е.е. значительная часть связанных генов связывала ISRE только в энхансерной области, т.е. с континуумом, т.е. значительная часть связанных генов прочно связывала ISRE только в энхансерной области. Независимо от того, присутствуют или отсутствуют пики в промоторных областях, наши результаты показывают, что большинство связанных генов связывают ISRE в своих энхансерных областях.

Связывание ISRE между типами клеток

Затем мы рассмотрели степень, в которой связанный ISRE был общим для разных типов клеток. Примерно 90% связанного ISRE в фибробластах и ​​В-клетках было связано с BMDM, в то время как около 20% связанного с BMDM ISRE было связано с двумя другими типами клеток.Фибробласты и В-клетки селезенки имеют примерно 25% связанного с ними ISRE, что дает общую картину широкого связывания ISRE при BMDM с связыванием фибробластов и B-клеток селезенки, отражающих различные подмножества ISRE, связанных с BMDM. Разделив связанный ISRE на область энхансера и промотора, мы обнаружили, что 20% связанного ISRE в области энхансера были общими для всех трех типов клеток, в то время как 60% связанного ISRE в области промотора были общими. В целом, 578 и 312 связанных ISRE, расположенных в энхансерной и промоторной областях, соответственно, были общими для всех трех типов клеток. Дополнительные сведения см. в Таблице 6.

biorxiv;2020.09.08.287581v1/TBL6T6tbl6

Показана доля связанного ISRE, общего в промоторных областях (верхние таблицы) и энхансерных областях (нижние таблицы) в типах клеток мыши (левые таблицы) и типах клеток человека (правая таблица). Диагональ каждой таблицы показывает долю связанного ISRE в типе ячеек, которые также связаны в двух других типах ячеек. Вне диагоналей показана доля связанного ISRE в типе ячейки строки, которые также связаны в типе ячейки столбца.Связанный ISRE в промоторных областях встречается с более высокими частотами, чем связанный ISRE в энхансерных областях. (FB=фибробласт)

Среди типов клеток человека не было ни одного типа клеток с более широкой реакцией, чем у двух других. Вместо этого HeLa и K562 разделяли примерно 60% своего связанного ISRE, в то время как THP1 разделяли 20% связанного ISRE с каждым из других типов клеток. У THP1 было около 500 связанных ISRE, в то время как у двух других типов ячеек было примерно 900, с разницей, возможно, из-за уже упомянутых технических проблем с наборами данных ChIP. Как и в мышиных типах клеток, связанный ISRE в области энхансера был общим для всех типов клеток в более низком процентном соотношении, чем связанный ISRE в области промотора, 11% и 65% соответственно. В целом, 51 и 108 связанных ISRE в энхансерной и промоторной областях, соответственно, были общими для всех трех типов клеток.

Мы провели анализ обогащения онтологии GO ([16, 50]) на генах со связанным ISRE, которые были общими для разных типов клеток, разделив анализ на гены с общим связанным ISRE в промоторной и энхансерной областях, соответственно; подробности см. в разделе Методы.Что касается промоторных областей, 169 генов связывали ISRE, общий для всех трех типов клеток мыши. Три класса GO с самым высоким p-значением представляли собой ответ на вирус, защитный ответ на вирус и ответ на интерферон-бета, и 33 из 169 генов, 20%, относились к классу защитного ответа на вирус. Напротив, 297 генов имеют общий связанный ISRE в области энхансера, а три класса GO с самым высоким значением p относятся к регуляции иммунного эффекторного процесса, регуляции гемопоэза и регуляции связывания хроматина. 15 из 297 генов были в защитном ответе на класс вируса, 5%, что значительно меньше, чем мы обнаружили для промоторных генов (значение p 5E-13).

Анализ обогащения ГО для типов клеток человека дал аналогичные результаты. Шестьдесят генов имеют общий связанный ISRE в промоторной области с высшими классами онтологии ГО защитного ответа на вирус, ответа на вирус и ответа на интерферон типа I. 27 из 60 генов, 45%, были отнесены к защитному ответу на вирусы класса ГО. Что касается области энхансера, 29 генов имеют общий связанный ISRE в области энхансера для разных типов клеток.Три основных обогащенных класса GO представляли собой клеточный ответ на интерферон I типа, сигнальный путь интерферона I типа и ответ на интерферон I типа. 5 из 29 генов, 17%, были в защитном ответе на вирус, что значительно меньше, чем для промоторной области (значение p 0,001).

В целом, гены с общим связанным ISRE в области энхансера были помечены как противовирусные в значительно более низких процентах, чем гены в области промотора. Это различие может отражать функциональные различия, но результаты могут отражать аннотации генов, полученные в исследованиях IFN, которые имеют тенденцию концентрироваться на генах с ISRE в промоторной области [20].Перекрытие между связанными ISRE в области энхансера, 6–31%, было ниже, чем в областях промотора, 41–92%, в соответствии с существующими моделями специфичности клеточного типа, в основном связанной с изменчивостью энхансера [33, 34, 17]. . Высокий процент перекрывающихся связанных ISRE в промоторных областях особенно важен, учитывая рассматриваемые несопоставимые типы клеток, например. фибробласты по сравнению с В-клетками и клетки HeLa по сравнению с клетками K562. В целом, эти результаты предполагают модель, в которой связывание ISRE в промоторных областях в значительной степени консервативно для разных типов клеток и связано с эффекторами вирусной защиты, в то время как связывание ISRE в энхансерных областях контролирует клеточно-специфические компоненты ответа IFN.

3. 2 Связывание ISRE и дифференциальная экспрессия

Чтобы исследовать корреляцию между связанными ISRE и ISG, мы загрузили наборы данных транскрипции, собранные в условиях гомеостаза и моделирования IFN: наборы данных RNAseq для клеток BMDM, фибробластов, HeLa и THP1 и наборы данных microarry для клеток B и K562. . Как и в случае с наборами данных ChIPseq, наборы данных различались по подтипу IFN (IFNa или IFNb), концентрации IFN и времени отбора проб, которое варьировалось от 2 до 6 часов. Для всех типов клеток наборы данных транскрипции и наборы данных STAT1, STAT2 и IRF9 ChIPseq, собранные при стимуляции IFN, подвергались воздействию одного и того же подтипа IFN и концентрации, хотя время отбора образцов незначительно различалось, конкретные значения см. в таблицах 2 и 3

Мы определили ген как ISG, что означает, что он дифференциально экспрессируется при стимуляции IFN, если уровень экспрессии гена изменился более чем на 50% при стимуляции IFN и если значение p с поправкой на FDR для дифференциальной экспрессии было меньше 0. 05 для наборов данных RNAseq и 0,01 для наборов данных микрочипов, подробности см. в разделе «Методы». BMDM имел примерно 1700 ISG, что согласуется с большим количеством связанных ISRE и центральной ролью BMDM во врожденном ответе. Другие типы клеток имели около 400 ISG, за исключением В-клеток, у которых было около 700, что, возможно, отражало более широкий интерфероновый ответ в иммунных клетках. В типах клеток мыши (BMDM, фибробласты и В-клетки) от 40% до 62% ISG были связаны, то есть имели связанный ISRE в пределах 100 т.п.о. от TSS.В типах клеток человека (HeLa, K562 и THP1) доля была намного ниже, 9–15%, см. Таблицу 7. В THP1 уже отмеченная проблема чувствительности может объяснить небольшой процент, а отсутствие чувствительности может распространяться на также другие типы клеток. Независимо от точного процента, во всех типах клеток был связан значительный процент ISG. То, что некоторые ISG были несвязанными, может отражать связанный ISRE, пропущенный нашим анализом, особенно в случае типов клеток человека, или пути передачи сигналов интерферона, независимые от компонентов ISGF3.

biorxiv;2020.09.08.287581v1/TBL7T7tbl7Таблица 7: связанных ISG.

Мы определили связанный ISG как ISG со связанным ISRE в пределах 100 КБ от TSS. Показаны (ISG) количество ISG, (связанный ISG) количество связанного ISG (связанный ISG (%)) и доля связанных ISG.

Затем мы исследовали распределение позиций связанных ISRE в связанных ISG. На нижней панели рисунка 2 показана доля связанных ISG со связанным ISRE в промоторных областях, энхансерных областях и только промоторных и только энхансерных областях, и она аналогична верхней панели рисунка 2, на которой представлены те же доли, но в сумме. связанных генов, а не связанных ISG.Сравнение нижней и верхней панелей на фиг. 2 показывает, что связанные ISG обогащены связанным ISRE в своих промоторах по сравнению со связанными генами. Тем не менее, значительный процент связанных ISG связывал ISRE в своей энхансерной области и только в своей энхансерной области, хотя агрессивность нашего определения пиков может смещать процент ISG со связанным ISRE только в энхансерных областях, как упоминалось ранее. В зависимости от типа клеток 26–80 % и 16–32 % связанных ISG имели связанный ISRE в энхансерной области и только в энхансерной области соответственно.

Чтобы проверить корреляцию между связыванием ISRE и ISG, мы сравнили долю генов, которые были ISG при различных позиционных конфигурациях связанного ISRE. Из генов со связанными

ISRE в промоторной области или в энхансерной области 22–68% и 26–80% были ISG соответственно. Для деконволюции вклада связанного ISRE в области промоторов и энхансеров мы сравнили гены без пиков ChIP с генами со связанным ISRE только в энхансере, только в промоторе и в энхансере и промоторе соответственно; см. рис. 3.Из генов без пика от 1% до 3% были ISG, в зависимости от типа клетки. Для всех типов клеток, кроме THP1, процент генов, которые были ISG, увеличивался по мере того, как мы переходили от отсутствия пиков к связанному ISRE только в энхансере, к связанному ISRE только в промоторе и к связанному ISRE в энхансере и промоторе. Когда связанный ISRE находился только в энхансере, 2%-12% генов были ISG, немного выше и статистически значимо больше во всех типах клеток, кроме K562, чем 1%-3%, наблюдаемые в генах без пика.Когда связанный ISRE находился только в промоторе, 25% — 69% генов были ISG, что значительно выше процентного содержания связанного ISRE только в энхансере во всех типах клеток. Относительно небольшое количество генов связывали ISRE в промоторе и энхансере, что ограничивало нашу статистическую мощность. Имея это в виду, когда связанный ISRE был как в промоторе, так и в энхансере, 33%-100% генов были ISG, что значительно больше, чем процент только для промоторов в BMDM и фибробластах, но не в других типах клеток, возможно, из-за небольшие размеры образцов.

biorxiv;2020.09.08.287581v1/FIG3F3fig3Рисунок 3. Связи между связанными ISRE и ISG.

Для каждого типа клеток столбцы показывают (слева направо) долю генов, которые являются ISG, над генами с (без пика) без пиков STAT1, STAT2 и IRF9 ChIPseq, (только энхансер) связанный ISRE только в области энхансера, (просто промотор) связанный ISRE только в промоторной области, и (enh и prom) связанный ISRE как в энхансерной, так и в промоторной областях. Звездочки обозначают статистически значимое увеличение с достоверностью более 95 % по сравнению с предыдущей (полоса слева) частотой и конфигурацией, подробности см. в тексте.(FB=фибробласт)

Мы также рассмотрели связь между связыванием ISRE и изменением кратности (FC) экспрессии от гомеостаза до стимуляции IFN. В ISG без пика, связанный ISRE только в энхансере, связанный ISRE только в промоторе и связанный ISRE как в промоторе, так и в энхансере, средний FC по типам клеток составлял 1,4, 1,6, 2,6 и 3,0 log2 соответственно.

Далее мы рассмотрели связь классов STAT2, STAT2.IRF9 и STAT1.STAT2.IRF9 ISRE с ISG.Чтобы сравнить экспрессию между классами, мы рассмотрели гены с одним связанным ISRE либо в энхансере, либо в промоторе и без пика в другом месте. (Учитывая, что один связанный ISRE контролируется для возможных корреляций между классом ISRE и количеством связанных ISRE.) Не было достаточного размера выборки для рассмотрения генов с одним связанным ISRE как в промоторной, так и в энхансерной областях. Мы обязательно ограничились типами клеток, для которых у нас был набор данных IRF9 ChIP, и мы исключили THP1 из-за проблем с чувствительностью, оставив BMDM, HeLa и фибробласты.

Когда связанный ISRE находился в промоторной области, см. верхнюю часть рисунка 4, процент генов, которые были ISG, возрастал последовательно, когда мы рассматривали классы ISRE STAT2, STAT2.IRF9 и STAT1.STAT2.IRF9 соответственно. При связывании STAT2 5–12% генов были ISG, при связывании STAT2:IRF9 — 18–46% и при связывании STAT1:STAT2:IRF9 — 58–60%. Процент связывания STAT2 не был значительно выше, чем 1–3%, которые мы отметили для генов без пика, что подтверждает нефункциональное или слабо функциональное связывание.Проценты STAT2.IRF9 были значительно выше, чем в генах без пика в BMDM и фибробластах, но не в HeLa, а проценты STAT1.STAT2.IRF9 были значительно выше, чем проценты STAT2.IRF9, что предполагает функциональную иерархию.

biorxiv;2020.09.08.287581v1/FIG4F4fig4Рис. 4. Связи между связанным классом ISRE и ISG.

Для каждого типа клеток столбцы показывают (слева направо) долю генов, которые представляют собой ISG, по сравнению с генами без пика, один связанный ISRE класса STAT2, STAT2.IRF9 или одиночный STAT1.STAT2.IRF9 только в промоторной (верхняя панель) или только в энхансерной (нижняя панель) областях. Процент генов, которые являются ISG, увеличивается в соответствии со связыванием ISRE с помощью STAT2, STAT2 и IRF9, а также STAT1, STAT2 и IRF9, что предполагает функциональную иерархию. Звездочки обозначают статистически значимое увеличение с достоверностью более 95% по сравнению с предыдущей частотой (полоса слева) и классом ISRE.

Когда связанный ISRE находился в области энхансера, см. нижнюю часть рисунка 4, проценты также последовательно увеличивались, поскольку мы рассматривали STAT2, STAT2.Классы IRF9 и STAT1.STAT2.IRF9 ISRE соответственно, но в целом процентное содержание было ниже, чем при связывании в промоторной области. Для связывания в области энхансера проценты, связанные со связыванием STAT2 и STAT2. IRF9, были незначительно выше, чем проценты в генах без пика. Но 10% — 11% генов, связанных STAT1.STAT2.IRF9, были ISG, что значительно больше, чем у генов без пика.

Уровни связывания ChIPseq связаны с функциональностью [26, 45], поэтому мы рассмотрели вершины пиков STAT2 ChIP, связанные с различными классами ISRE.Как показано на рисунке 5, у STAT2 ISRE высота вершины значительно ниже, чем у других классов, а у STAT2.IRF9 высота вершины значительно ниже, чем у STAT1.STAT2.IRF9.

biorxiv;2020.09.08.287581v1/FIG5F5fig5Рис. 5. Уровни связывания ChIPseq для STAT2 в классах ISRE.

Показано распределение высот пиков в наборах данных STAT2 ChIPseq в ISRE разных классов. Высота вершины класса STAT1.STAT2.IRF9 ISRE была наибольшей, что свидетельствует о самой сильной привязке к ISRE и поддержке функциональной иерархии в классах привязки ISRE.

В целом, наш анализ показывает сильную связь между связыванием ISRE в промоторной области и дифференциальной экспрессией при стимуляции IFN. Мы также отметили значительную, хотя и более слабую связь между связыванием ISRE в энхансерных областях и дифференциальной экспрессией. Однако ассоциация слабая или отсутствует, когда мы ограничиваемся ISRE, связанным с STAT2, и слабее для ISRE, связанного с STAT2.IRF9, чем ISRE, связанного с STAT1.STAT2.IRF9. Наш класс STAT2 ISRE может представлять неправильную классификацию STAT2.IRF9 или STAT1.STAT2.IRF9 ISRE. Неспособность STAT2 стабильно связываться с ДНК в отсутствие IRF9 поддерживает эту точку зрения [8]. Напротив, многочисленные сообщения подтверждают существование димеров STAT2.IRF9, которые функционально важны и не зависят от экспрессии STAT1 [25, 6, 61].

3.3 Прогнозирование связывания ISRE по гомеостатическому, эпигенетическому состоянию

Затем мы спросили, можно ли использовать гомеостатическое эпигенетическое состояние клетки и последовательности ДНК, связанные с локусами ISRE, для точного прогнозирования связывания ISRE при стимуляции IFN.Связанный с каждым ISRE, мы сформировали локус из 1010 пар оснований, состоящий из мотива ISRE из 10 пар оснований и 500 пар оснований выше и ниже мотива. Чтобы описать гомеостатическое состояние, доступность и состояние гистонов, мы собрали наборы данных ATACseq и h4K4ME1, h4K4ME3 и h4K27AC ChIPseq для каждого из наших типов клеток. Все наборы данных были загружены из GEO или ENCODE и собраны при гомеостазе, подробности см. в Таблице 1. Для каждого набора данных ATACseq и ChIPseq мы использовали MACS2 для построения сигнала (SPMR) по привязанному локусу 1010, подробности см. в разделе «Материалы и методы».Для количественной оценки наличия сайтов связывания факторов ко-транскрипции мы собрали мотивы TF из базы данных JASPAR [27] и сопоставили их с последовательностями локусов ISRE. Чтобы учесть специфичность последовательности, мы использовали нуклеотидную последовательность локусов ISRE для описания мотива ISRE, содержания CpG и формы ДНК. Наконец, мы также загрузили наборы данных STAT1, STAT2 и IRF9 ChIPseq, собранные при гомеостазе, и сформировали сигнал для каждого локуса ISRE из этих наборов данных, как мы сделали с наборами данных ATACseq и гистонов, см. Таблицу 2.В целом, мы охарактеризовали гомеостатическое состояние с помощью доступности хроматина (ATACseq), маркировки гистонов (наборы данных h4K4ME1, h4K4ME3, h4K27AC ChIPseq), мотивов фактора ко-транскрипции (мотивы JASPAR), специфичности последовательностей (последовательность ДНК локуса ISRE) и STAT1, STAT2, и связывание IRF9 (ChIPseq).

Для количественной оценки предсказательной способности гомеостатического состояния мы построили бинарные классификаторы для различения пар классов ISRE на основе гомеостатических данных. Мы рассмотрели классы связанных ИСРЕ и несвязанных ИСРЕ.Важно отметить, что эти классы были определены с использованием наборов данных, собранных при стимуляции IFN. Связанные классы ISRE включали классы, которые мы описали выше, отражающие ассоциации STAT1, STAT2 и IRF9 с ISRE, например. класс STAT2 ISRE, класс STAT2.IRF9 ISRE и т. д., но мы также рассматривали ISRE, которые были связаны в данном типе клеток, по крайней мере, STAT2, но, возможно, также STAT1 и IRF9, но не были связаны в других типах клеток, ссылаясь на эти ISRE как собственный класс ISRE. Мы также определили классы несвязанных ISRE: ISRE, которые не были связаны STAT1, STAT2 или IRF9 в любом типе клеток, которые мы назвали непиковым классом, локусы, которые не были связаны с ISRE, которые мы назвали фоновым классом, и ISRE, которые не были связаны STAT1, STAT2 или IRF9 в данном типе клеток, но были связаны в каком-то другом типе клеток, который мы назвали комплементарным классом ISRE.Несвязанные классы представляют собой иерархию: локусы в фоновом классе не имеют ISRE, локусы в непиковом классе имеют ISRE, которые не связаны ни с одним типом клеток, локусы в классе комплемента не связаны с данным типом клеток. но связаны с другими типами клеток.

Мы создали двоичные классификаторы, чтобы отличать связанный класс ISRE от несвязанного класса ISRE в каждом типе ячеек. Например, мы создали классификатор, чтобы отличить класс ISRE STAT1.STAT2.IRF9 от непикового класса в BMDM, что означает, что мы собрали все локусы ISRE в BMDM, связанные STAT1.STAT2.IRF9 и все локусы ISRE не связаны ни с одним типом клеток, и построил классификатор, который различает два класса ISRE на основе гомеостатического состояния локусов ISRE. Учитывая наши результаты, предполагающие, что класс STAT2 ISRE представляет собой нефункциональную привязку, мы также создали классификаторы, чтобы отличать связанные классы ISRE, отличные от класса STAT2 ISRE, от класса STAT2 ISRE. Как более подробно описано ниже и в разделе «Методы», мы преобразовали гомеостатические сигналы, мотивы JASPAR и нуклеотидные последовательности локусов ISRE в признаки и использовали логистическую регрессию L1 для построения бинарных классификаторов.Во всех случаях мы обучали каждый классификатор, используя половину соответствующих локусов ISRE, а другую половину использовали для проверки точности предсказания. Мы использовали AUROC (AUC) и точность в качестве показателей точности прогноза. В основном тексте мы приводим значения AUC, значения прецизионности приведены в дополнительной информации. Мы построили классификаторы только для пар классов с достаточным размером выборки (т. е. достаточным количеством ISRE в каждом классе), чтобы AUC больше 0,55 и точность больше 0,60 были статистически значимыми при 0. 05, подробности см. в разделе «Материалы и методы».

Мы построили непиковый класс ISRE посредством однозначного сопоставления с привязанным ISRE. Как мы упоминали выше, было 2-3 миллиона непиковых ISRE (несвязанных мотивов ISRE), но только несколько тысяч связанных ISRE (12 438 в геноме мыши и 1 548 в геноме человека, если быть точным). Для каждого связанного ISRE мы случайным образом выбирали непиковый ISRE с соответствующим расстоянием до TSS гена, где гены, которые мы рассматривали, находились в наборе генов со связанным ISRE.Мы построили класс фоновых локусов таким же образом, за исключением того, что мы случайным образом выбрали локус, а не мотив ISRE. Важно отметить, что, выбрав непиковый и фоновый класс таким ограниченным образом, мы оценили нашу способность отличать связанный ISRE от типичного несвязанного ISRE, а не нашу способность отличать связанный ISRE от всех несвязанных ISRE.

Доступность хроматина

На рис. 6А показан средний гомеостатический сигнал ATACseq для ISRE, разделенный по классу ISRE, типу клеток и промоторной или энхансерной области. Чтобы нормализовать сигналы, для каждого типа клеток и комбинации областей генов мы масштабировали сигнал так, чтобы фоновый класс имел средний сигнал 0,

biorxiv;2020.09.08.287581v1/FIG6F6fig6.

(A) Средний сигнал ATACseq по локусу из 1010 пар оснований, окружающему каждый ISRE, разделенный по классу ISRE, типу клеток и областям энхансера (верхние панели) и промотора (нижние панели). Средние сигналы нормализуются так, что фоновый средний сигнал равен 0 во всех положениях.(B) Распределение сигналов ATACseq в BMDM в среднем положении локуса 1010 пар оснований. Нижние и верхние усы дают 5% и 95% квантилей соответственно, а нижняя и верхняя петли дают 25% и 75% квантилей. Сигналы показаны только для классов ISRE с более чем 75 ISRE. Несвязанные классы ISRE окрашены в серый цвет. На панели A фоновый сигнал не показан, непиковый сигнал закрашен сплошным цветом, а дополнительный сигнал заштрихован. (np=non-peak, back=фон, comp=complement)

Для ISRE в области энхансера непиковый ISRE имел средние сигналы, которые были отрицательными, что означает, что несвязанный ISRE во всех типах клеток был в среднем менее доступен, чем фон, явление, отмеченное и другими авторами [3, 15]. Связанные классы ISRE имели положительные средние сигналы, что означает, что связанный ISRE имел повышенную доступность по сравнению с фоном. ISRE в классе дополнений имел уровень доступности чуть выше фона, в то время как ISRE в классе self имел более высокие уровни доступности. Напомним, ISRE в классе self были связаны только с данным типом клеток, тогда как ISRE в классе комплемента были связаны только с другими типами клеток. Поскольку все ISRE в собственных и комплементарных классах связаны с некоторым типом клеток, их дифференциальная доступность отражает клеточно-специфические механизмы.Во всех типах клеток связанный ISRE в энхансере имел максимальное плато с центром в мотиве ISRE и протяженностью примерно 200 пар оснований, что соответствует отсутствию нуклеосомы [10].

Средние значения сигналов для ISRE в промоторных областях были разными. В отличие от ISRE в области энхансера, связанные сигналы класса ISRE не отделялись от фона. Связанный ISRE в промоторной области, как правило, не проявляет профиля плато, наблюдаемого в энхансерных областях, возможно, потому, что истощение нуклеосом является обычным явлением в промоторных областях. Непиковый ISRE в промоторных областях показал падение сигнала в положении мотива ISRE во всех типах клеток, что свидетельствует о расположении нуклеосомы в ISRE.

Чтобы визуализировать распределение сигналов за пределами средних значений, мы рассмотрели центральное положение сигнала ATACseq в локусах ISRE, положение 505 из 1010. На рисунке 6B показано распределение сигналов в этом положении для BMDM, снова расщепленного энхансером. (верхняя панель) и промоторные области (нижняя панель), но в данном случае мы не нормализовали сигнал по фону; другие типы клеток имели сходное распределение средних сигналов.Для ISRE в области энхансера сигналы связанных классов ISRE превышали фон, в то время как для ISRE в промоторных областях сигналы связанных ISRE перекрывались с фоном. Как можно было ожидать, доступность ISRE была выше в области промотора независимо от класса, что отражает отличное состояние хроматина ISRE между двумя областями.

Для построения классификаторов с использованием гомеостатических сигналов ATACseq мы определили набор из 12 признаков (значений), состоящих из среднего значения сигнала по локусу ISRE из 1010 пар оснований и доли сигнала, содержащегося в одиннадцати окнах из 90 пар оснований, охватывающих локус (окна не включали 10 пар оснований на дальних концах). Мы построили бинарные классификаторы, рассматривая один из связанных классов ISRE в сравнении с одним из несвязанных (непиковых, фоновых или дополнительных) классов или классом STAT2.

В соответствии с сигнальными средствами связанный ISRE в области энхансера относительно точно отличался от непикового класса, при этом AUC варьировалась от 0,70 до 0,90 в зависимости от класса связанного ISRE, а точность превышала 0,90 для всех связанных классов ISRE. , см. рисунок 7A для значений AUC и дополнительный рисунок S1A для значений точности.Предсказание в области промотора было менее точным, при этом значения AUC и точности были ниже значений энхансера на 0,05–0,15 и 0,10–0,30 соответственно. Тем не менее связанный ISRE можно было отличить от непикового ISRE в промоторной области со значительным уровнем точности.

biorxiv;2020.09.08.287581v1/FIG7F7fig7Рис. 7. Точность прогнозирования с использованием ATACseq.

(A) AUC для прогнозирования связанных классов ISRE по сравнению с непиковым классом ISRE для ISRE в областях энхансера (E) и промотора (P). (B) AUC связанных классов ISRE по сравнению с непиковыми (n-p), фоновыми (обратными), комплементарными (comp) и STAT2 (S2) классами для ISRE в энхансерной области. Прогнозы, включающие классы ISRE с менее чем 20 ISRE, не рассматривались. Из-за ограниченных размеров выборки для клеток HeLa мы объединили STAT2.IRF9 и STAT1.STAT2.IRF ISRE в один класс ISRE (S2.I9,S1.S2.I9)

Затем мы рассмотрели точность предсказания связанных классов ISRE по сравнению с несвязанные классы ISRE и STAT2 ISRE. Промоторные области имели меньше связанного ISRE, что приводило к ограничению нашей статистической мощности, поэтому мы ограничили наш анализ энхансерными областями, подробности см. в разделе «Методы».AUC и точность предсказания последовательно снижались по мере того, как мы сравнивали связанные классы ISRE с непиковыми, фоновыми, комплементарными и STAT ISRE-классами соответственно; см. рисунок 7B для значений AUC и дополнительный рисунок S1B для значений точности. Для всех типов клеток и связанных классов ISRE AUC и точность по отношению к классу STAT2 ISRE составляли 0,60 или ниже, уровень точности лишь немного превышал пороговое значение 0,55 для статистической значимости. Таким образом, доступность хроматина не является отличительной характеристикой силы сигнала ChIP в STAT1.STAT2.IRF9, STAT2.IRF9 ISRE и STAT2 ISRE (вспомните рисунок 5). Комплемент ISRE занимал промежуточное положение между непиковым ISRE и фоновыми локусами, которые точно отличались от связанного ISRE, и класса STAT2 ISRE. Промежуточный уровень точности может отражать ошибочную классификацию связанного ISRE как комплементарного ISRE, или комплементарный ISRE может просто иметь диапазон доступности хроматина.

Модификации гистонов

Затем мы рассмотрели сигналы для наборов данных h4K4ME1, h4K4ME3 и h4K27AC ChIP, разделив, как и раньше, по типу клеток, классу ISRE и энхансерным и промоторным областям.На рис. 8 показаны средние сигналы для ISRE в области энхансера. Во всех трех модификациях гистонов и всех типах клеток класс ISRE без пика имел сниженный сигнал по сравнению с фоновым сигналом, как и в случае средних сигналов ATACseq, что указывает на общее затишье несвязанных ISRE. Сигналы h4K4ME1 и h4K27AC для связанных классов ISRE были выше, чем у фонового класса во всех типах клеток. Напротив, сигналы h4K4ME3 связанных классов ISRE не отличались от фонового сигнала в BMDM, фибробластах и ​​K562, но были повышены в клетках HeLa, B и THP1.Как и в случае с сигналами ATACseq, сигнал класса комплемента был лишь немного увеличен по сравнению с фоном, в то время как собственный класс имел более высокий сигнал, чем фон, снова демонстрируя клеточно-специфические различия в гомеостатическом состоянии. Сигналы модификации гистонов в области промотора отличались от сигналов в области энхансера, см. Дополнительную фигуру S2. Средний фоновый сигнал в промоторной области четко не отличался от среднего сигнала связанных ISRE.

biorxiv;2020.09.08.287581v1/FIG8F8fig8Рисунок 8: Профили сигналов ChIPseq модификации гистонов.

Показаны средние сигналы ChIPseq, разделенные по типу клеток и классу ISRE, для ISRE в энхансерных областях. Связанные сигналы ISRE были отделены от фона во всех типах клеток для модификаций h4K4ME1 и h4K27AC, но не для модификаций h4K4ME3. Во всех типах клеток и модификациях гистонов непиковый ISRE имел более низкие сигналы, чем фон. Фоновый сигнал был нормализован до 0 и не показан, непиковый сигнал закрашен сплошным цветом, а дополнительный сигнал заштрихован.

Как и для сигнала ATACseq, мы создали классификаторы для предсказания класса ISRE на основе гомеостатических сигналов гистонов. Мы сравнили точность классификации с использованием каждого из трех сигналов модификации гистонов ChIPseq и сигналов ATACseq, см. рис. 9. В целом, сигналы h4K4ME1 имели наилучшую прогностическую точность. Напротив, классификация с использованием h4K4ME3 имела значительно более низкую точность предсказания, чем ATACseq, для всех типов клеток, кроме клеток HeLa. Как и в случае предсказания с использованием ATACseq, точность предсказания последовательно снижалась по мере того, как связанные классы ISRE сравнивались с непиковым ISRE, фоновым, комплементарным ISRE и STAT2 ISRE, и, кроме того, точность предсказания была выше для ISRE в области энхансера, чем в области энхансера. регион промоутер.

biorxiv;2020.09.08.287581v1/FIG9F9fig9Рисунок 9: Точность прогнозирования классов ISRE с использованием сигналов ChIPseq модификации гистонов.

(A) AUC для прогнозирования связанных классов ISRE в области энхансера по сравнению с непиковым классом ISRE с использованием сигналов модификации ATACseq и гистонов. В целом, h4K4ME1 обеспечивает наилучшую точность. (B) Сравнение AUC для прогнозирования связанных классов ISRE с непиковым классом в областях энхансера (E) и промотора (P) с использованием сигналов h4K4ME1 ChIPseq.(C) AUC для прогнозирования связанного ISRE в области энхансера по сравнению с различными несвязанными классами ISRE и классом STAT2 с использованием сигналов h4K4ME1 ChIPseq. Обратите внимание на сходство панелей (B) и (C) с результатами с использованием сигнала ATACseq, показанными на рисунке 7.

Мотивы факторов транскрипции

Далее мы рассмотрели мотивы различных факторов транскрипции (TF) в локусах ISRE из 1010 пар оснований. Мы рассмотрели 746 мотивов TF в наборе данных JASPAR по позвоночным [27]. Для каждого мотива TF и ​​каждого локуса ISRE мы использовали MEME-FIMO ([31]) для вычисления оценки, отражающей наилучшее возможное совпадение мотива TF с последовательностью локуса.При оценке мотивов TF мы игнорировали совпадения, включающие 10 пар оснований мотива ISRE, на котором был центрирован локус. Используя 746 баллов для каждого локуса в качестве признаков, мы построили бинарные классификаторы, как и для наборов данных ATACseq и histone, ChIP.

Для ISRE в области энхансера классификация с использованием мотивов была не такой точной, как классификация с использованием сигналов h4K4ME1, за исключением фибробластов. Напротив, в промоторных областях значения AUC с использованием мотивов были примерно равны или превышали значения AUC h4K4ME1 во всех типах клеток, кроме В-клеток.См. Дополнительный рисунок S3.

Классификаторы отобрали сотни мотивов в качестве предикторов пикового связывания. Поскольку наши значения AUC и точности были рассчитаны на тестовом наборе данных, а сравнение между обучающим и тестовым AUC показало лишь небольшие различия, включение нескольких мотивов в классификации не представляло переобучения. Вместо этого большое количество мотивов, вероятно, отражает корреляцию между различными мотивами.

Мы стремились идентифицировать отдельные мотивы со значительным уровнем точности предсказания.Поскольку размеры выборки были больше, мы сосредоточились на ISRE в энхансерных областях. Мы построили бинарные классификаторы, используя каждый из 746 TF в качестве единственного предиктора, и идентифицировали мотивы TF со значениями AUC и точности, которые были значительно повышены при FDR 0,05. Для каждого типа клеток мы собрали 3 наиболее значимых мотива в классификации связанного ISRE против непикового ISRE и собственного ISRE против комплементарного ISRE, см. Таблицу 8. В классификации против непикового ISRE мотив JASPAR STAT1::STAT2, который является мотивом ISRE, присутствовал во всех типах клеток, кроме клеток HeLa, в соответствии с предыдущими результатами, предполагающими мультимерное связывание ISRE [78, 44]. (Напомним, мы удалили мотивы ISRE, на которых каждый локус ISRE был сосредоточен, при вычислении оценок мотивов, поэтому мотив STAT1: STAT2 соответствовал другим ISRE в локусах.) Кроме того, мы обнаружили несколько мотивов IRF в клетках BMDM, фибробластах и ​​K562. . Напротив, когда мы сравнили собственный ISRE с ISRE комплемента, который, по-видимому, должен дифференцироваться по клеточно-специфическим мотивам, мотив STAT1:STAT2 и мотивы IRF не присутствовали ни в одном типе клеток, и мотивы не были общими для всех типов клеток, что подтверждает клеточно-специфические мотивы. специфическая регуляция локусов ISRE.

biorxiv;2020.09.08.287581v1/TBL8T8tbl8Таблица 8: отдельных мотивов со значительной прогностической способностью.

Мы идентифицировали мотивы, которые классифицировали связанный ISRE по сравнению с непиковым ISRE (связанный по сравнению с непиковым) и собственный ISRE по сравнению с комплементарным ISRE (собственный по сравнению с комплементом) со статистически значимой AUC и точностью. Для каждого типа клеток показаны 3 значимых мотива с наивысшей точностью. Мотивы, отличающие связанный ISRE от ISRE без пика, были обогащены мотивами STAT и IRF и не были специфичными для типа клеток.Мотивы, отличающие собственный ISRE (ISRE, связанный только с данным типом клеток) от комплементарного ISRE (ISRE, связанный с другими типами клеток, кроме данного типа клеток), были специфичными для типа клеток.

Последовательность

Затем мы исследовали, являются ли специфичности последовательности, не связанные с ко-транскрипционными факторами, прогностическими для класса ISRE. Чтобы кодировать нуклеотидную последовательность мотива ISRE в центре локуса, мы рассмотрели окно из 30 пар оснований, начиная с 10 пар оснований выше мотива ISRE и заканчивая 10 парами оснований ниже.Для каждой позиции в окне мы определили признаки, определяющие нуклеотид позиции, кодирование, подобное матрице весов позиций (ШИМ) мотива в этих позициях, рассматриваются независимо, поэтому мы называем эти функции признаками ШИМ.

Мы также рассмотрели форму ДНК в том же окне из 30 пар оснований. Мателье и др. рассчитали характеристики формы ДНК из последовательности ДНК [49], и мы использовали R-пакет DNAshapeR [12] для вычисления 5 различных характеристик формы (ширина малой бороздки, вращение, закручивание пропеллера, закручивание спирали и электростатический потенциал) с использованием пяти пар оснований. окно с центром в каждой паре оснований в нашем окне из 30 пар оснований, что дает нам 150 признаков формы.Наконец, мы также рассмотрели содержание CpG в локусе 1010 пар оснований, содержащем каждый ISRE. Чтобы определить особенности CpG, мы определили как признаки общее количество пар CpG в локусе, а также долю пар CpG в пределах 11 окон, разлагающих локус (как мы сделали для сигналов ATACseq и гистонов).

Мы создали бинарные классификаторы, используя функции CpG, PWM и формы, а также классификаторы, сочетающие все эти функции. Для ISRE в области энхансера характеристики ШИМ и формы имели примерно одинаковую AUC и точность в диапазоне 0. 7 0 -0,90 и 0,80 — 0,95 соответственно, в то время как признаки CpG имели низкую AUC и точность, см. Фигуру 10A. Сочетание функций PWM и формы увеличило AUC до 0,10. Во всех типах клеток, кроме BMDM, точность для ISRE в промоторной области была аналогична AUC для ISRE в энхансере, чего особенно не наблюдалось при использовании сигналов ATACseq и гистонового ChIPseq. Как и прежде, мы классифицировали связанный ISRE по классам непиковых, комплементарных и STAT ISRE. (В данном случае мы не включали фоновый класс, потому что отсутствие мотива ISRE означало, что фоновые локусы полностью отличались от связанного ISRE.) В отличие от сигналов ATACseq и гистонов, классификация связанного ISRE по сравнению с классом комплемента имела AUC значительно меньше, чем AUC по сравнению с непиковым классом во всех типах клеток, что позволяет предположить, что последовательность ISRE является сильным предиктором ISRE, которые никогда не связываются, но слабый предиктор клеточно-специфического связывания ISRE; см. рисунок 10В.

biorxiv;2020.09.08.287581v1/FIG10F10fig10Рис. 10. Точность прогнозирования с использованием последовательностей ДНК.

AUC для предсказания связанных классов ISRE в области энхансера по сравнению с (A) непиковым классом ISRE с использованием CpG, PWM, типов признаков формы и всех трех типов признаков вместе (seq) и (B) по сравнению с различными несвязанными Классы ISRE и класс STAT2, использующие комбинированные функции (seq).

Чтобы лучше понять паттерны последовательностей, предсказывающие класс ISRE, мы рассмотрели вклад различных нуклеотидов в каждой позиции окна из 30 пар оснований в вероятность того, что ISRE был связан в соответствии с нашими классификаторами. Фигура 11 показывает относительную важность нуклеотидов в различении STAT2.IRF9 и STAT1.STAT2.IRF9 ISRE от фонового, непикового, комплементарного и STAT2 ISRE в энхансерной области BMDM; другие типы клеток показали аналогичные результаты. Положительные и отрицательные значения представляют собой нуклеотиды, которые увеличивают и уменьшают, соответственно, вероятность того, что ISRE относится к классам STAT2.IRF9 или STAT1.STAT2.IRF9. Когда STAT2.IRF9 или STAT1.STAT2.IRF9 ISRE сравнивали с фоном, мы видели канонический паттерн TTTCNNTTTC, отражающий отсутствие мотива ISRE на фоновых локусах. Напротив, по сравнению с ISRE без пика, STAT2.IRF9 или STAT1.STAT2.IRF9 ISRE были обогащены каноническим паттерном TTTC на 5′-конце мотива и паттерном TT на 3′-конце, но каждое положение менее предсказуема, чем в случае фона.Мы не видим типичного мотива TTTCNNTTTC, потому что все ISRE в непиковом классе находятся в пределах одного нуклеотида от этого мотива. Для сравнения ISRE STAT2.IRF9 и STAT1.STAT2.IRF9 с ISRE STAT2 было обнаружено обогащение G во 2-м положении в мотиве ISRE, что позволяет предположить, что ISRE STAT2.IRF9 и STAT1.STAT2.IRF9 были обогащены мотивом TGTTNNTTTC по сравнению с STAT2 ISRE, но все остальные позиции внесли слабый вклад или не внесли никакого вклада в дифференциацию классов. Наконец, при сравнении STAT2 практически не было обогащения.IRF9 и STAT1.STAT2.IRF9 ISRE дополняют ISRE, предполагая, что клеточная специфичность связывания ISRE не опосредована последовательностью ISRE.

biorxiv;2020.09.08.287581v1/FIG11F11fig11Рис. 11: Визуализация предиктивной способности функций ШИМ.

Для каждой позиции в окне из 30 пар оснований, включая мотив ISRE из 10 пар оснований, мы использовали присутствие A, C, G и T в качестве признака для классификации классов STAT2.IRF9 и STAT1.STAT2.IRF9 ISRE по фону. , непиковый, комплементарный и STAT2 ISRE.Показаны вклады различных нуклеотидов в разных положениях в вероятность того, что ISRE относится к классам STAT2.IRF9 и STAT1.STAT2.IRF9. Положительные и отрицательные значения означают, что у нуклеотида соответственно увеличилась и уменьшилась вероятность. Показаны 10 пар оснований, покрывающих мотив ISRE (желтая рамка), и 2 положения пар оснований вверх и вниз по течению.

Гомеостатические сигналы STAT1, STAT2 и IRF9

Затем мы рассмотрели гомеостатические сигналы наборов данных STAT1, STAT2 и IRF9 ChIP способом, полностью аналогичным нашей обработке сигналов ATACseq и гистоновых ChIP. Для клеток K562 у нас не было данных STAT1 и STAT2 ChIPseq при гомеостазе. Вместо гомеостаза наборы данных K562 STAT1 и STAT2 ChIPseq собирали через 30 минут после стимуляции IFN, в отличие от наборов данных, стимулированных IFN для клеток K562, которые собирали через 6 часов.

На рис. 12 показаны гомеостатические, средние сигналы STAT1, STAT2 и IRF9. В отличие от результатов для сигналов ATACseq и гистонов средние сигналы связанного ISRE в областях энхансера и промотора были сходными после нормализации по отношению к фоновым средним сигналам.Средние сигналы непикового класса были по существу нулевыми, даже для клеток K562, в соответствии с ожиданием того, что фоновые локусы и непиковый ISRE оба по существу не будут иметь связывания STAT1, STAT2 или IRF9. Связанные классы ISRE имели положительные средние сигналы во всех типах клеток и как в промоторной, так и в энхансерной областях, за исключением энхансерной области фибробластов. Сигналы K562 были особенно повышены, что отражает 30-минутную стимуляцию IFN. ISRE в классе комплемента имел небольшой положительный или нулевой средний сигнал, в то время как ISRE в собственном классе имел повышенный средний сигнал по типам клеток, подтверждая наличие клеточно-специфического связывания в гомеостазе.

biorxiv;2020.09.08.287581v1/FIG12F12fig12Рис. 12. Профили гомеостатических сигналов STAT1, STAT2 и IRF9 ChIPseq.

Показаны средние сигналы ChIPseq, разделенные по типу клеток и классу ISRE, для ISRE в (A) энхансерных областях и (B) промоторных областях. Все сигналы взяты из наборов данных, собранных при гомеостазе, за исключением клеток K562, образцы которых были отобраны через 30 минут после стимуляции IFN. Фоновый сигнал нормализован до 0 и не показан; непиковый сигнал отображается сплошным цветом, а дополнительный сигнал отображается пунктиром.

Прежде чем перейти к бинарным классификаторам, мы решили назвать пики ChIP так же, как и для наборов данных ChIP, собранных при стимуляции IFN. Мы назвали пики, ассоциированные пики с ISRE, и разделили связанный ISRE на классы точно так же, как мы сделали для наборов данных при стимуляции IFN. Игнорируя клетки K562, во всех типах клеток было относительно небольшое количество ISRE, связанных в гомеостазе, по крайней мере, как это определяется MACS2 с использованием FDR 0,01. Количество ISRE, связанных при гомеостазе, составляло 1–5% от количества, связанного при стимуляции IFN, для всех типов клеток, кроме THP1, для которых количество ISRE при гомеостазе составляло 17% от количества при стимуляции IFN.Во всех типах клеток менее 6% ISRE, связанного при стимуляции IFN, также связывались в гомеостатических условиях. Наоборот, значительный процент ISRE, связанный в гомеостазе, также был связан при стимуляции IFN. Для BMDM и В-клеток селезенки 96% и 66% ISRE, связанного в гомеостатическом состоянии, связывались при стимуляции IFN. Для фибробластов, HeLa и THP1 процент варьировался от 16% до 36%. Подробности см. в таблице 9.

biorxiv;2020. 09.08.287581v1/TBL9T9tbl9Таблица 9: гомеостатически связанный ISRE..

Точно так же, как мы идентифицировали связанный ISRE при стимуляции IFN, мы идентифицировали связанный ISRE при гомеостазе. Показаны количество связанных ISRE при стимуляции IFN (IFN) и при гомеостазе (гомеостаз), количество ISRE, которые были связаны при стимуляции IFN и гомеостазе (совместно), доля связанных ISRE при стимуляции IFN, которые также были связаны при гомеостазе. (совместный (IFN)), и фракция связанного ISRE в гомеостазе, которая также была связана при стимуляции IFN (совместный (гомео)). Пики K562 отражают наборы данных ChIPseq, собранные через 30 минут после стимуляции IFN, а не при гомеостазе.

Как и для предыдущих гомеостатических факторов, мы создали классификаторы для прогнозирования класса ISRE с использованием гомеостатических сигналов, сигналов STAT1, STAT2 и IRF9 по отдельности и совместно. Мы называем совместные признаки сигналов STAT1, STAT2 и IRF9 свойствами ISGF3. Точность прогнозирования с использованием функций IRF9 или ISGF3 была примерно одинаковой, по крайней мере, для типов клеток, для которых у нас были наборы данных IRF9 ChIPseq. IRF9 был лучшим предиктором, чем STAT2, который был лучшим предиктором, чем STAT1. Для функций ISGF3 значение AUC было лучше, чем 0.80 в BMDM и В-клетках, но менее 0,70 в клетках HeLa и фибробластах. Мы предполагаем, что эта разница отражает большее связывание ISRE при гомеостазе в иммунных клетках, чем в неиммунных клетках. Интересно и несколько обнадеживает, что значения AUC для клеток K562 превышали 0,95, показывая, что связывание STAT1 и STAT2 через 30 минут после стимуляции IFN точно предсказывает связывание ISRE через 6 часов. В отличие от точности прогнозирования с использованием сигналов ATACseq или гистонов, точность для ISRE в промоторных областях была примерно такой же или лучше, чем в энхансерной области, см. Фигуру 13.

biorxiv;2020.09.08.287581v1/FIG13F13fig13Рис. 13. Точность прогнозирования с использованием сигналов STAT1, STAT2 и IRF9 ChIPseq.

AUC для прогнозирования связанного ISRE по сравнению с непиковым ISRE в областях энхансера (A) и промотора (B).

Совместное предсказание

Затем мы сравнили точность предсказания, связанную с комбинациями наших типов признаков: признаки хроматина, сформированные путем объединения признаков ATACseq и гистонов, признаки последовательности, сформированные путем объединения признаков PWM и формы, признаки ISGF3, сформированные путем объединения STAT1, STAT2 , и особенности IRF9, и особенности мотива.Для ISRE в областях энхансера точность предсказания увеличивалась последовательно, поскольку мы использовали признаки мотива, последовательности и хроматина соответственно, за исключением фибробластов, в то время как для ISRE в областях промотора признаки последовательности имели самую высокую точность для фибробластов, HeLa и K562, и только немного ниже особенностей хроматина в BMDM и B-клетках. Точность предсказания признаков ISGF3 была относительно высокой для одних типов клеток и низкой для других; общая последовательность и особенности хроматина были лучшими предикторами; см. рисунок 14.

biorxiv;2020.09.08.287581v1/FIG14F14fig14Рис. 14. Точность прогнозирования с использованием различных типов объектов.

AUC для прогнозирования связанного ISRE по сравнению с непиковым ISRE в областях энхансера (A) и промотора (B).

Чтобы понять полную точность предсказания гомеостатического состояния. мы рассмотрели точность предсказания с использованием признаков хроматина, признаков хроматина в сочетании с признаками последовательности и объединенных признаков хроматина, последовательности и ISGF3; см. рисунок 15. Особенности мотива мало чем отличались в сочетании с другими типами функций.В соответствии с предыдущими результатами [85], добавление признаков последовательности к признакам хроматина повышало AUC на 0,05–0,10, хотя в фибробластах разница была больше, 0,15. Добавление признаков ISGF3 к признакам хроматина и последовательности повысило AUC еще на 0,05–0,10. Примечательно, что когда мы использовали все гомеостатические признаки, мы могли отличить связанный ISRE от непикового ISRE в области энхансера с AUC больше 0,90 во всех случаях. Для промоторных областей наблюдалась аналогичная тенденция к увеличению, но значения AUC были примерно равны 0.на 10 ниже, чем значения AUC для энхансерных областей. Наконец, когда мы использовали все гомеостатические признаки для классификации связанного ISRE по классам непикового, комплементарного и STAT2 ISRE, мы обнаружили, что AUC снижались последовательно. Значения AUC для классификации связанного ISRE по сравнению с ISRE комплемента находились в пределах 0,75–0,90, демонстрируя, что ISRE связаны с клеточно-специфическими гомеостатическими состояниями. Значения AUC для классификации связанного ISRE по сравнению со STAT2 ISRE были менее 0,70, что свидетельствует о неправильной классификации STAT2 ISRE или о том, что наши гомеостатические характеристики или гомеостатическое состояние обычно не включают факторы, которые отличают ISRE, связанный STAT2, от ISRE, связанного другими комбинациями компонентов ISGF3.

biorxiv;2020.09.08.287581v1/FIG15F15fig15Рис. 15. Точность прогнозирования с использованием всех функций.

AUC для предсказания связанного ISRE против непикового ISRE в энхансерной (A) и промоторной (B) областях и (C) против непикового, комплементарного и STAT2 ISRE в энхансерной области.

Para medir a potência da corrente deve ser usado. Medição de energia elétrica atual

Вт podem ser divididos em três categorias — baixa frequência (е corrente continua), radiofrequência e optica.Os ватт да faixa де радио пункт finalidade а дие себе destinam são divididos em dois tipos: potência transida, incluída na interrupção da linha de transmissão, e potência absorvida, conectada ao final da linha como uma carga coordenada. Dependendo сделать método де conversão функциональный дас informações де medição е sua saída пункт о operador, ОС medidores де potência são analógicos (exibição е gravação) е digitais.

Medidores de baixa frequência e energia CC

Os LF-wattímetros são usados ​​principalmente em redes de fontes de alimentação industriais de frequência para medir o consumo de energia, podem ser monofásicas e trifásicas. Um subgrupo separado é varômetros   — medidores de potência reativa. Os Instrumentos digitais geralmente combinam a capacidade de medir potência ativa e reativa.

  • Os wattímetros analógicos de LF de um sistema eletrodinâmico ou ferrodinâmico têm duas bobinas no mecanismo de medição, uma das quais é conectada em série à carga e a outra em paralelo. Interação душ campos magnéticos дас bobinas cria ум крутящий момент дие desvia flecha сделать dispositivo, proporcional ao produto да corrente, tensão e cosseno ou seno da diferença де fase (para medir a potência ativa ou reativa).
    • ОБРАЗЦЫ   Ц301, Д8002, Д5071
  • Os wattímetros digitais LF possuem dois sensores como Circuitos de entrada — corrente e tensão, conectados em série e paralelos à carga, respectivamente, os sensores podem basear-se na medição de transformadores, termistores, termopares e outros. Поскольку информация о датчиках отключена от ADC, он передает пункт, предназначенный для вычислений, но не соответствует требованиям, предъявляемым к реактивам, в качестве конечной информации, которую можно использовать для отображения цифрового e, se necessário, em dispositivos externos (para armazenar, imprimir dados и т. д.).
    • ПРИМЕРЫ   MI 2010A, CP3010, §02

Ваттометры мощности, поглощающей радиочастоты

Os ватт de potência absorvida formam um subgrupo muito grande e amplamente usado де ватт де радиочастот. A divisão de espécies desse subgrupo está mainmente associada ao uso de varios tipos de transdutores primários (cabeças рецепторы). Em ватт disponíveis коммерческий, são usados ​​conversores baseados em termistor, termopar e детектор де пико; com muito menos frequência, em trabalhos Experimentais, os sensores são usados ​​com base em outros princípios — motor de lagoa, galvanomagnético и т. д.Ao trabalhar com wattímetros de potência absorvida, deve-se lembrar que, devido à propência imperfeita da impedância de entrada das cabeças receptoras com a impedância de onda da linha, parte da energia é refletida eo wattímetro realmente mede não a potência Incidente, , который отличается от инцидента, который имеет количественное значение, равное KP × P pad onde KP  — коэффициент рефлекса мощности.

  • Os wattímetros de termistor (bolométricos), консистентный конвертор де recebimento baseado em um termistor (ou bolometro) e uma ponte de medição com uma fonte de baixa frequência alimentação CA  para aquecer o termistor.O princípio де operação де ум conversor де термистор состоит на dependência да сопротивления делать термистор эм суа температура де aquecimento, que, пор суа вез, depende да potência dissipada сделать синал fornecido а эле. Medição é realizada comparando potência do sinal medido dissipado no termistor e aquecendo-o com uma corrente de baixa frequência que causa o mesmo aquecimento do termistor. Durante a medição, potência total dissipada pelo termistor (ao aplicar simultaneamente o sinal medido ea corrente de aquecimento) e, consequentemente, a Resistance do termistor é mantida a mesma com a ajuda de uma ponte de medição, que é Equilibrada pela Mudança na corrente де aquecimento.Nos primeiros modelos de ватт термистор, или balanceamento foi realizado manualmente; нет баланса мощности современных ватт, поскольку они не соответствуют цифровому формату. As desvantagens душ wattímetros де термистор são sua pequena faixa dinâmica — potência maxima de dissipação — alguns miliwatts; essa limitação é superada pelo uso de atenuadores que Divisionm a energia, mas introduzem um erro adicional.
  • Os wattímetros calorimétricos diferem dos termistores, pois uma carga separada é usada para absorver a potência medida, da qual o calor é transferido para o conversor do termistor através de uma água destilada média ou um líquido especial.O meio líquido circula Uma vazão estritamente especificada, lavando a carga de entrada, o conversor e o trocador de calor de resfriamento.
    • ПРИМЕРЫ M3-13, MK3-68, MK3-70
  • Os medidores thermoelétricos de energia usam um termopar (ou bloco de thermopares) de aquecimento direto ou indireto como conversor primário. Ao medir, junção quente do termopar aquece sob influência da potência de entrada do sinal medido, e é gerada uma termo-fem.Как Informações де medição на форма де ум sinal DC Сан alimentadas ума unidade eletronica (аналогический или цифровой), onde são processadas электронной alimentadas ум dispositivo indicador.
    • ПРИМЕРЫ   M3-51, M3-56, M3-93
  • Os ватт dos Detectes de пико-сан-де-дизайн простой, ao contrário де outros типос де ватт, eles são capazes de medir não apenas a potência de um sinal contínuo, mas tambem a potência de pico dos pulsos de rádio, no entanto, dev à baixa precisão das medições, eles raramente são usados ​​no momento.De acordo com o princípio de operação, esse wattímetro é um voltímetro CA retificador com carga na entrada com uma Resistance igual à impedância de onda do cabo e com um dispositivo de relatório clerado em termos de potência.

Wattímetros da potência passante de um alcance de rádio

Em ватт мощности передачи, как primário conversor, geralmente é usado um acoplador direcional — um dispositivo que allowe que uma fração muito pequena de energia seja ramificada do caminho main de transmissão.A parte desviada da energia é fornecida a um conversor secundário, por instanceo, um детектор ou cabeçote termistor, de onde o sinal de informação de medição é fornecido ao conversor funcional e, além disso, ao dispositivo indicador. Em frequências relativamente baixas (nas faixas LW e CB), é difícil o uso de acopladores direcionais, neste caso, sensores de corrente e tensão na linha podem ser usados ​​como conversores primários, cujas informações de medição (multiplicação de valores levando em рассмотрит разницу в фазе).) Os sensores podem ser, por instanceo, um transformador de tensão e um transformador de corrente. Esse método де medição geralmente é usado эм dispositivos especializados пункт controlar a saida де energia да антена пор ум передатчик де радио. Em frequências ultra altas, nos caminhos do guia de ondas, o método motor de lagoa ou os sensores embutidos na parede do guia de ondas — термистор, термоэлектрико, гальваномагнетико — podem ser usados ​​para medir a potência transida.

  • ПРИМЕРЫ   M2-23, M2-32, NAS

Оптические ваттметры

  • ОБРАЗЦЫ   ОМК3-69, ОМ3-65

Имена и обозначения

  • Особые номера
    • Medidor de potência   — внешний номер для ваттметров оптики и радио
    • Quilowattímetro   — um dispositivo para medir potência de grandes valores (unidades de centenas de quilowatts
    • Милливаттметр  — um dispositivo para medir a potência de pequenos valores (menos de 1 ватт)
    • Varmeter  — приспособление для средних и активных действий
    • Ваттварметр — прибор для средней мощности и реактивности
  • PARA AIDIAR OS Tipos de Watts Elétricos (Baixa Permentcia), é tradizionalmente usado dum sistema de notação eSsizico do Sistema de notação escepífico do sitor, без квалификации os.
  • Ts xx — устройство для защиты от повреждений
  • F xx U xx — устройство электронной системы
  • N xx — гравадорес
  • Os ватт dos rádios e faixas opticas são marcados de acordo com ГОСТ 15094
    • M1 -xx — medidores de potência de referência de alta precisão
    • M2- xx PM2- xx — мощность передачи (мощность радио)
    • M3- xx PM3- xx — мощность поглощаемой мощности (альканс для радио)
    • M5- xx — conversores рецепторы (cabeças) de ватт
    • OM3- xx — оптические медиорес абсорбенты
  • В качестве основных характеристик

    • Faixa de medição
    • Erro de medição Permitido (для электронной медицины — класс точности)
    • Разрешение VSWR — мощность для радиочастот

    Литература и документы

    Литература

    • Referencia de Instrumentação Elétrica ; Эд. К.К. Ильюнина — Л.: Энергоатомиздат,
    • Руководство по использованию медицинских инструментов для радио : Em 3 t .; Эд. В. С. Насонова — М.: Сов. радио
    • Майзда Ф. Instrumentos e métodos de medição eletronicos  — М.: Мир,
    • Manual de dispositivos eletrônicos : Em 2 t .; Эд. Д.П. Линде — М.: Энергия,

    Нормативная и техническая документация

    • ГОСТ 8476-78 Ваттметры и варометры. Especificações gerais
    • ГОСТ 8476-93 Аналоговые устройства, предназначенные для использования в качестве вспомогательного оборудования для посредников.Часть 3. Requisitos especiais para wattsímetros e varômetros
    • ГОСТ 8.392-80 Государственная система гарантий и унифицированных медицинских услуг. Wattímetros de microondas de baixa potência e seus conversores de medição principais na faixa de frequência 0,03–78, 33 ГГц. Métodos e meios de verificação
    • ГОСТ 8.397-80 Государственная система гарантий и унифицированных медицинских услуг. Medidores де potência де guia де onda де пульсо де baixa potência на faixa де frequência 5,64-37,5 ГГц. Métodos e meios de verificação
    • ГОСТ 8.497-83 Sistema estadual para garantir uniformidade das medições. Амперметры, вольтметры, ватты, варометры. Метод проверки
    • Sistema de estado ГОСТ 8.569-2000 para garantir a uniformidade das medições. Medidores де potência де microondas де baixa potência на faixa де frequência де 0,02 до 178,6 ГГц. Методы проверки и калибровки
    • IEC 61315 (1995) Calibração de medidores de power (ватты) radiação de fibra óptica

    Conectado em série à carga e conectado em paralelo a ela.Para determinar a potência, é necessário multiplicar as leituras do amperímetro e do voltímetro.

    Mais Frequencyemente, a energia nas redes CA é medida diretamente com. Este dispositivo possui duas bobinas, uma das quais (corrente) é conectada em série à carga, a outra (bobina de tensão) — em paralelo.

    Рис. 1. Circuitos de comutação de wattímetro para medir a potência de corrente trifásica: a — com carga uniforme; б — ao conectar rectares de energia com um triangulo e uma carga de fase uniforme; in — com uma carga desigual de fases.


    Para medir potência em redes CA monofásicas aplique dispositivos de elemento unico de um ferrodinâmico ferrodinâmico do type D307 e do typeo portátil D568. O dispositivo possui duas bobinas. Uma bobina де tensão com um grande número de voltas está localizada dentro de uma bobina de corrente fixa e montada em um eixo. Seta indicadora do dispositivo tambem é fixada no eixo. Interação дас correntes дас bobinas серийный e paralela cria ум крутящий момент дие gira о eixo ком seta. Os desvios da seta são proporcionais à potência ativa do рецептор.Uma Mudança на direção да corrente (isto é, fase) em 180 ° em um dos enrolamentos do wattímetro faz com que a seta se desvie na direção oposta. Portanto, os grampos das bobinas (corrente e tensão), que são conectados e conectados à fonte, são chamados de geradores e são indicados por um asterisco.

    Para medição em chainos de corrente trifásicos com carga de fase uniforme  use um medidor de energia de elemento unico incluído em uma das fases, de acordo com o Circuito Mostrado na Fig. 1, а, б. Nesse caso, as leituras do dispositivo devem ser triplicadas.

    O dispositivo deve estar ligado para que uma corrente de fase flua através do enrolamento serial e o enrolamento paralelo seja ligado à tensão de fase.

    Sob uma carga desigual de fases, a potência em sistemas de três fios pode ser medida por dois watts, incluídos como mostrado na Fig. 1, c. Nesse Caso, Potência Levada EM Рассматриваетção POR CADA UM DOS Watts éngual a:






    Ao Adicionar As Leituras DOS DOIS Watts:

    Assim, Potência EM Sistemas Trifásicos de Três Fios Pode Ser Medida Usango dois ватты или um wattímetro де dois elementos, isto é, um Instrumento Que Consiste em Dois wattímetros monofásicos operando em um eixo comum e fechados em um alojamento.Diagrama de Circuito  um wattímetro trifásico e um Circuito para conectá-lo à rede são Mostrados na Fig. 2)


    Рис. 2. Esquema para conectar um wattímetro à rede (380 В, 50 Гц) с преобразователем тока и напряжением в медицине


      Para medir a corrente trifásica em Circuitos de quatro fios, são utilizados três ватт, cada um dos quais mede a potência ativa de uma fase. Potência ativa do Circuito é definida como soma das leituras de todos os ватт.

    Nossa indústria produz medidores de energia portateis trifasicos dos typeos D85, D542, D124 и т. д., и др. D304, D305, D335, D345, D345, D349, D1503 и т. д. Nos navios de construção doméstica, instalam dos medidores de energia D16 Д174.

    Os enrolamentos em série desses medidores de energia são conectados através de um transformador de corrente com enrolamento secundário 5 A e através de um transformador de corrente intermediária 5 / 0,3 типо I1820. Os enrolamentos paralelos para as voltagens 127 e 220 V incluem diretamente e para 380 V — através de um transformador de tensão de medição 380/127 V; класс точности 2.5. Esses dispositivos podem medir potência de até 4000 кВт.

    Medição de energia corrente elétrica

    Para medir a energia da corrente elétrica, são utilizados contadores.   Nas designações dos contadores, letras e números significam: C — contador; А — активная энергия; Р — энергия реактива; О — монофазная; 3 или 4 — para uma rede de três ou quatro fios; U é универсальный; E — промышленная система медицины; Т — десемпеньо тропический; 670, 672 и т. д. — projeto estrutural.

    Deve-se observar apenas que os contadores de dois e três elementos para medições em sistemas de corrente trifásica de três e quatro fios possuem dois disco.

    Os medidores elétricos de corrente continua (SA — ампер-час, CB — вольт-час, SCW — киловатт-час) dos sistemas eletro e ferrodinâmicos são produzidos para conexão direta ou para inclusão em peças auxiliares.

    Os medidores de eletricidade não são instalados nos navios e o consumo de energia é levado em рассмотрит возможность согласования с carga media diária

        ГОСТ 6570–75 «Medidores elétricos de indução de energia ativa e reativa. Especificações gerais.»

        ГОСТ 8476-93″ Rebalitivos Analógicos Mostrando Medidores Elétricos de Ação Direta E Suas Partes AuxiAis Para MediDores E Varômetros.

        ГОСТ 10287-83 «Medidores Elétricos de Corrente Contínua.

        ГОСТ 25372-82 «Medidores de Energia Elétrica. Onlegia».

        ГОСТ 25990-83 «Medidores Elétricos de Energia Ativa da Classe de Precisão 2. 0. Противоречие децеиты.»

        ГОСТ 26035-83 «Medidores Eltricos de Energia Elétrica де корренте альтернатива.Especificações gerais»,

    Инструменты для электрического сопротивления, емкости, промышленности и взаимной промышленности

        ГОСТ 6746-94 «Средства электрического сопротивления. Especificações gerais.

        ГОСТ 7165-93 «Понты CC для среднего сопротивления». Condições técnicas gerais.

    Rebalitivos

    PARA Medição Medição Medição Medição Medição

    E ângulo de Fase

    E Angulo de Fase

      ГОСТ 7590-93 «Rebalitivos Analógicos Mostrando Mediodores Elétricos de Ação Direta E Suas Partes Auxiles.Часть 4. Requisitos especiais para medidores de frequência.

      ГОСТ 8039–93 «Аналоговые устройства для средних и средних электрических нужд и вспомогательных средств. Часть 5. Requisitos especiais para medidores de fase, medidores de fator de potência e sincronoscópios.

      Dispositivos para medir indução magnética, força do campo magnético e fluxo magnético.

      ГОСТ 6746–75 «Медидас де капацидада. Especificações gerais.

      ГОСТ 9486–79 «Medindo pontes CA.Condições técnicas gerais.

    Outros aparelhos elétricos

        ГОСТ 9181–74 «Medidores elétricos. Embalagem, rotulagem, transporte armazenamento.

        ГОСТ 9829–81 «Осциллографы с датчиком света. Condições técnicas gerais.

        ГОСТ 11013–81 «Гальванометры магнитоэлектрические осциллографические. Especificações gerais. »

        ГОСТ 15855–77 «Medições de tempo e frequência. Termos e definições».

        ГОСТ 27537–87 «Указатели цифровые.Especificações gerais.

        ГОСТ 23854–79 «Медидорес де нивель. Реквизиты технических средств и методов испытаний».

        ГОСТ 27300–87 «ИИС. Requisitos gerais, integridade e regras para compilação da documentação Operating ».

        Конденсаторы ГОСТ 28885–90». Métodos de medição e teste «.

    Dispositivos secundário пункт medição е regulamento Não elétrico quantidades elétricas

    métodos

        ГОСТ 7164-78 «Dispositivos де balanceamento де rastreamento Automatico GSP. Especificações gerais.

        ГОСТ 9736–91 «Устройства для проведения расчетов по медицинским услугам».

    Физические испытания резины | СпрингерЛинк

    ‘) var head = document.getElementsByTagName(«head»)[0] var script = document.createElement(«сценарий») script.type = «текст/javascript» сценарий.src = «https://buy.springer.com/assets/js/buybox-bundle-52d08dec1e.js» script.id = «ecommerce-scripts-» ​​+ метка времени head.appendChild (скрипт) var buybox = document.querySelector(«[data-id=id_»+ метка времени +»]»).parentNode ;[].slice.call(buybox.querySelectorAll(«.вариант-покупки»)).forEach(initCollapsibles) функция initCollapsibles(подписка, индекс) { var toggle = подписка. querySelector(«.Цена-варианта-покупки») подписка.classList.remove(«расширенный») var form = подписка.querySelector(«.форма-варианта-покупки») если (форма) { вар formAction = form.getAttribute(«действие») document.querySelector(«#ecommerce-scripts-» ​​+ timestamp).addEventListener(«load», bindModal(form, formAction, timestamp, index), false) } var priceInfo = подписка.селектор запросов(«.Информация о цене») var PurchaseOption = toggle.parentElement если (переключить && форма && priceInfo) { toggle.setAttribute(«роль», «кнопка») toggle.setAttribute(«tabindex», «0») toggle.addEventListener («щелчок», функция (событие) { var expand = toggle. getAttribute(«aria-expanded») === «true» || ложный переключать.setAttribute(«расширенная ария», !расширенная) form.hidden = расширенный если (! расширено) { покупкаOption.classList.add(«расширенный») } еще { покупкаOption.classList.remove(«расширенный») } priceInfo.hidden = расширенный }, ложный) } } функция bindModal (форма, formAction, метка времени, индекс) { var weHasBrowserSupport = окно.выборка && Array.from функция возврата () { var Buybox = EcommScripts ? EcommScripts.Buybox : ноль var Modal = EcommScripts ? EcommScripts.Modal : ноль if (weHasBrowserSupport && Buybox && Modal) { var modalID = «ecomm-modal_» + метка времени + «_» + индекс var modal = новый модальный (modalID) модальный. domEl.addEventListener(«закрыть», закрыть) функция закрыть () { form.querySelector(«кнопка[тип=отправить]»).фокус() } вар корзинаURL = «/корзина» var cartModalURL = «/cart?messageOnly=1» форма.setAttribute( «действие», formAction.replace(cartURL, cartModalURL) ) var formSubmit = Buybox.перехват формы отправки ( Buybox.fetchFormAction(окно.fetch), Buybox.triggerModalAfterAddToCartSuccess(модальный), функция () { form.removeEventListener («отправить», formSubmit, false) форма. setAttribute( «действие», formAction.replace(cartModalURL, cartURL) ) форма.представить() } ) form.addEventListener («отправить», formSubmit, ложь) document.body.appendChild(modal.domEl) } } } функция initKeyControls() { document.addEventListener («нажатие клавиши», функция (событие) { если (документ.activeElement.classList.contains(«цена-варианта-покупки») && (event.code === «Пробел» || event.code === «Enter»)) { если (document.activeElement) { событие. preventDefault() документ.activeElement.click() } } }, ложный) } функция InitialStateOpen() { var узкаяBuyboxArea = покупная коробка.смещениеШирина -1 ;[].slice.call(buybox.querySelectorAll(«.опция покупки»)).forEach(функция (опция, индекс) { var toggle = option.querySelector(«.цена-варианта-покупки») var form = option.querySelector(«.форма-варианта-покупки») var priceInfo = option.querySelector(«.Информация о цене») если (allOptionsInitiallyCollapsed || узкаяBuyboxArea && индекс > 0) { переключать.setAttribute («ария-расширенная», «ложь») form.hidden = «скрытый» priceInfo.hidden = «скрытый» } еще { переключить.

    Оставить комментарий